我的细胞怎么了？

qingtinglueshui

这是我养的小鼠骨髓间充质干细胞，用的DMEM/F12+四季青血清（取原代后先用10%的血清养了8天，感觉状态不好换成20%养了4天）养了12天还没有传代，细胞密度还是很稀，不知道是怎么回事，大家帮我看一下吧。下面是我养的msc的图片：
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shylook

干细胞你也敢用四季青这样的国产血清3 i, y0 t6 h/ H- I9 b& ?) Q: L2 T
果断换gibico

fananran2003

很大可能是血清的问题，像那种星状的有很多枝丫的细胞应该就是营养成分不足造成的，本人也有过这种经历，长不起来了，下回细胞密度不要太低，这类细胞有时候密度低了不爱长，有条件的话培养液中加点细胞因子( O2 C( b4 D% v3 e0 w

wangzhiqi86

干细胞肯定要用FBS啊

yangwy028

做实验的话可以用进口的胎牛血清的。你这个很明显就是细胞还缺乏养分呢。这个是加的什么生长因子？

qingtinglueshui

回复 yangwy028 的帖子( ]. e4 N! l  F' V, e( l
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没有加细胞因子，就是DMEMF12+20%的四季青胎牛血清培养，取了原代有12天，还没有传代呢。之前我用的10%的血清，后来换成20%的培养，可还是长得很慢，有什么好的建议嘛？

meiying3061

四季青的血清养干细胞肯定是不行的，要用ES级的进口血清。

yangwy028

FBS一般都是原代用15%的，有利于细胞分化和培养，传代用10%或者8%的就可以了。你也可以自己把细胞分成几批，加不同浓度的血清来养对照一下，看看哪个浓度最合适。不过总之你的这个浓度忽高忽低确实是有点问题的。

yangwy028

形态没有什么问题的，就是长得确实慢了些，再继续养几天肯定会好起来的哈。  
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zzc2211

建议楼主把细胞分成不同的密度，不同的血清浓度，不同的血清，摸摸条件，3.5cm dish或6孔板，也不太费东西，很快出结果。总比乱撞好，省时间。