干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 正在培养内皮祖细胞的来讨论吧,呵呵 [打印本页]

作者: liucz001    时间: 2011-11-13 16:53     标题: 正在培养内皮祖细胞的来讨论吧,呵呵

本帖最后由 细胞海洋 于 2011-11-13 23:20 编辑
% a3 |, ~; m. W1 f) J0 g( O) e# P. T. J
最近正在培养内皮祖细胞,本论坛人气不足啊,,希望斑竹多多支持,谢谢了,培养内皮祖细胞真的好难啊。
作者: haiq1984    时间: 2011-11-13 20:01

把方法拿出来讨论嘛!!
" H% o9 p; D- e6 Z7 y; f比如来源呀,培养基的选择,培养方式的选择等等
作者: yyshpy    时间: 2011-11-14 17:57

我培养过血管内皮细胞,还好吧,没有那么难啊,普通培养基,原代的话注意防止污染就行了
作者: yyshpy    时间: 2011-11-14 17:57

内皮细胞的形态很漂亮,胖胖的铺路石啊
作者: 细胞-77    时间: 2011-11-14 18:15

你养的是什么内皮啊?我们实验室养角膜内皮,内皮就一层细胞,得出经验了也不是很难的。你的实验方法是什么呢?遇到的困难是什么呢?
作者: yyshpy    时间: 2011-11-15 20:32

血管内皮,注意取材的时候防止污染,原代消化的时候把握尺度,不能太过,传代的时候根据属性摸索密度,我传的密度比较低,内皮细胞生长挺快的
作者: ronain    时间: 2011-11-16 17:33

本帖最后由 ronain 于 2011-11-16 17:38 编辑
- j2 G4 A; e) L8 F/ H  \8 _2 a6 }. t( _: H3 F6 o( C
大鼠骨髓来源,密度梯度离心单个核细胞,EGM-2MV培养基,48h后取贴壁细胞继续培养。但是细胞集落出现的不多,长得很慢,而且集落形态不一,有梭形卵圆形,但还有很多像成纤维细胞。是不是分离液用的不对呀,需要把细胞提纯才能长得快吗?
作者: zz091115    时间: 2011-11-21 23:22

回复 ronain 的帖子4 r. {: ~" A4 W5 ^  {# z. P; [' b

  o2 @  r" n, @) nEPC不好搞 的确我也碰到过你的情况 传上几代会好点 但是还是不能做到很纯 除非你用FACS或是MACS去分选 但是那样得率不高最后细胞数量少 EPC又是密度依赖型的
作者: youndie    时间: 2011-11-22 09:39

我做脐血来源EPC,EGM-2MV培养基,我的细胞克隆出现时间通常是2-3W以后,可是看许多文章(特别是中文文章)说是3-5天就出现了,对于这点很是不解。3-5天我也养出来过克隆,可是此类克隆明显不是EPC的形态,到是和MSC形态相似,且增殖能力有限。不知道在这里做脐血来源EPC同行怎么看这个问题?
作者: 细胞海洋    时间: 2011-11-22 10:45

回复 youndie 的帖子' @/ ^% y! y# S" w* {

" f" e2 g/ g4 ~  c% r4 T" W; m建议你发新帖提问
作者: henryjia    时间: 2012-3-2 05:37

youndie 发表于 2011-11-22 09:39
4 r: H' \1 B: h/ Z8 I* X我做脐血来源EPC,EGM-2MV培养基,我的细胞克隆出现时间通常是2-3W以后,可是看许多文章(特别是中文文章) ...

+ c' D; G; o/ g& P! e- x, V" B; e同意。我的也是。但是EPC一代形成细胞克隆,生长很快,而且我最高传到8袋(弟子),呵呵,还是很稳定。
作者: violet_sc    时间: 2012-5-23 18:21

回复 henryjia 的帖子8 S) g5 E% D% g4 M
, ~+ Z$ O& @0 v. o4 |6 p% p
你好   我刚开始养EPC 按照中英文文章都试过  可是都没有成功啊  现在这个是前几天增殖明显  现在都不生长了  能和你交流交流 向你请教下吗?
作者: 细胞海洋    时间: 2012-5-24 10:58

回复 violet_sc 的帖子4 j* z1 x6 S7 |  y+ |. l

! a% t) Q% z) @+ t$ ~4 {发新帖说明你的实验过程
作者: violet_sc    时间: 2012-5-24 18:46

回复 细胞海洋 的帖子
! R( o( h# z# I8 j( ?5 R6 v
/ }6 t7 i/ B0 g6 v& j1 W5 [好的,谢谢。求分析内皮祖细胞分离培养失败的原因
% G- O9 E/ _; k7 G3 Y% Y, k. ^http://www.stemcell8.cn/thread-56376-1-1.html
- I+ a# v7 N( `- b这是我的实验步骤,能告诉我你的步骤吗?




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5