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楼主: zsc78
go

看一看这个是不是脐带组织MSCs?谢谢!     [复制链接]

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31楼
发表于 2011-11-21 09:55 |只看该作者
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从形态上看很像,这是传了几代的

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32楼
发表于 2011-11-23 16:27 |只看该作者
跟我们养的差不多,贴块的确可以得到较纯的间充质,但时间长,你用多长时出集落?用二型或四型酶试试,Gibco的
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33楼
发表于 2011-11-23 19:56 |只看该作者
回复 linghuchong123 的帖子+ a9 q. Z8 _- x% W& z3 r
; U" W( y% ~# L, j. b7 z
我的一般10~15天左右传第一代。我的胶原酶是一型。
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34楼
发表于 2011-11-24 05:31 |只看该作者
是MSC 而且形态相当不错,/ J% W+ K& F4 V( q% |; V
, G+ o8 o# v" V8 D0 {) z; m
脐带消化是一个很让人头痛的问题。是否粘稠其实取决于胶原酶用量和稀释度。如果你尝试2g脐带10ml胶原酶(1mg/ml)会在1小时内完全消化。我一般会过滤,然后用缓冲液或培养基多洗几次。' d5 q4 r: d7 b6 K' {1 x
+ `! Y' ]" O. J$ r, K, |  Q
如果粘稠如果冻说明胶原蛋白消化不完全。
* r4 b/ H% D& }+ ?0 R" T. L
1 m% t" Y7 T: U; d8 H6 a% k同意其他人意见,分化的潜能我感觉脐带不如其他来源。还是骨髓好些。
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35楼
发表于 2011-11-24 05:39 |只看该作者
回复 田甜 的帖子' p& G7 _( V8 l7 t( S# |5 g* T
$ H' D6 _" W6 H/ Q8 P. U! Q  C
胶原酶对细胞还是由伤害的,这样做有风险。不知道你的细胞分化功能如何?尝试过直接接种消化液,感觉不如大量稀释冲洗结果好。4 {6 i1 [% {! K- _

8 [) S& R1 w$ q( W4 [建议尝试1:10的稀释再冲洗。
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36楼
发表于 2011-11-24 09:49 |只看该作者
首先恭喜楼主,这个目测是MSCs,而且状态非常好,建议你做下MARK确认下。果冻样胶可以冲洗稀释。贴块法细胞贴壁以后组织块可以一晃,二用PBS吹洗来彻底清洗干净。
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37楼
发表于 2011-11-24 15:28 |只看该作者
LZ上传的确为MSC,这个可以放心。
. M& M. r0 L' D$ O我们做的时候是剥离血管后再见碎贴块,刚开始只加很少量培养液,能保持组织块湿润状态,第二天才补加培养液到刚好浸泡组织块。! R4 k& E" _/ s+ |1 B
不过所需时间较长,一般三周左右。
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38楼
发表于 2011-12-9 22:59 |只看该作者
我最近用I型胶原酶和透明质酸酶消化,能很快得到细胞,不像组织贴壁法,很久看不到细胞,心慌。
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发表于 2011-12-10 21:13 |只看该作者
是间充质细胞
8 f8 b0 f0 S, h" A

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40楼
发表于 2011-12-13 19:39 |只看该作者
是。和我的结果一样
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