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有没有人用过MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-14 22:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有人用过MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒?我买了两个盒子了,严格按照步骤来做的,怎么就是染不出来呢?有没有做过的?关键步骤是什么呢?
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专家 优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2011-11-14 23:21 |只看该作者
第一, 你染的什么细胞? 如果是ES细胞, 需要确保细胞处于未分化状态; 如果是其他干细胞, 需要以未分化的ES细胞做阳性对照.
# q7 M  }" `0 h9 e* |% \
( N, C! V+ q' N, G, e) Q' Z1 R% H第二, 看看你的盒子是否过期. 一般的保质期是半年. 过了保质期的盒子,如果时间比较长了,也是染不出来的.8 V) f1 L# B2 b9 x1 s. W8 A) x

; {$ ^8 @, U/ K- R: Q* {; r作这个染色还是比较简单的, 用4%多聚甲醛固定细胞时, 不能超过2分钟, 其他的按照说明书做就是了.
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藤椅
发表于 2011-11-14 23:25 |只看该作者
回复 jefferson 的帖子
  R5 I+ `. v) v5 U% R; }9 y
4 f8 J- x9 g9 d: b* Q& ^* f, M我做的是小鼠的胚胎干细胞D3,确定细胞未分化,试剂盒也是刚买的,就是染不出来,郁闷死了,还不如国产的盒子呢
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板凳
发表于 2011-11-15 09:17 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我用过啊,没问题啊~~~
- R2 p; }8 N2 }5 i  H; \3 I! M, Q3 Y你是怎么做的啊??
7 R$ t/ q" k# @你买的试剂盒是不是盗版的??
9 ~* p6 s/ b/ N1 u6 o( u唉,我实在想不出来有什么问题~~~
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报纸
发表于 2011-11-15 15:15 |只看该作者
你那个反应液混合以后一定要立即加到细胞当中,越迅速越好,然后避光反应。另外固定的时间严格按照要求不要太长。
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地板
发表于 2011-12-1 16:48 |只看该作者
我也在用MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒,颜色好浅,跟没染上差不多的,我也怀疑是不是盗版的,一楼用的是哪个批次的,看看我们的试剂盒是否同一个批次。
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发表于 2011-12-1 17:21 |只看该作者
既然不如国产的,那就支持国货吧
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发表于 2011-12-2 15:45 |只看该作者
我也用了millipore的盒子。一点颜色也没有
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-12-2 15:57 |只看该作者
我也用过Milipore的,虽然我确定是能用的,但是颜色太淡了,发文章没法用的,建议用Sigma的吧。
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发表于 2011-12-2 16:00 |只看该作者
回复 Yedan 的帖子$ I, F: m" R5 A: N2 I

! h3 i' z* ]$ p- }9 P* T# j9 Y请问sigma的碱性磷酸酶染色试剂盒怎么使用.?操作过程中需要注意那些地方
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