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有没有人用过MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-11-14 22:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有人用过MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒?我买了两个盒子了,严格按照步骤来做的,怎么就是染不出来呢?有没有做过的?关键步骤是什么呢?
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专家 优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2011-11-14 23:21 |只看该作者
第一, 你染的什么细胞? 如果是ES细胞, 需要确保细胞处于未分化状态; 如果是其他干细胞, 需要以未分化的ES细胞做阳性对照.7 I$ d. d: D% v! ?; L& A- b3 u
6 _1 ~' n6 M) `* g6 G* X/ p
第二, 看看你的盒子是否过期. 一般的保质期是半年. 过了保质期的盒子,如果时间比较长了,也是染不出来的.
) ~& ~6 P2 }+ M. l) F( B6 R- u; ]& S9 O' B% L8 Z
作这个染色还是比较简单的, 用4%多聚甲醛固定细胞时, 不能超过2分钟, 其他的按照说明书做就是了.
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藤椅
发表于 2011-11-14 23:25 |只看该作者
回复 jefferson 的帖子# Q# ]# S. a6 }5 x# i1 g

  _# u- ^) [% s/ w0 j$ W我做的是小鼠的胚胎干细胞D3,确定细胞未分化,试剂盒也是刚买的,就是染不出来,郁闷死了,还不如国产的盒子呢
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板凳
发表于 2011-11-15 09:17 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
我用过啊,没问题啊~~~7 D; n! }- D+ ~! t- O
你是怎么做的啊??% n3 X, y% E3 Z) d3 v3 X' H
你买的试剂盒是不是盗版的??
( k/ l" o- w, U: s唉,我实在想不出来有什么问题~~~
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报纸
发表于 2011-11-15 15:15 |只看该作者
你那个反应液混合以后一定要立即加到细胞当中,越迅速越好,然后避光反应。另外固定的时间严格按照要求不要太长。
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地板
发表于 2011-12-1 16:48 |只看该作者
我也在用MILLIPORE的碱性磷酸酶染色试剂盒,颜色好浅,跟没染上差不多的,我也怀疑是不是盗版的,一楼用的是哪个批次的,看看我们的试剂盒是否同一个批次。
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发表于 2011-12-1 17:21 |只看该作者
既然不如国产的,那就支持国货吧
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发表于 2011-12-2 15:45 |只看该作者
我也用了millipore的盒子。一点颜色也没有
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-12-2 15:57 |只看该作者
我也用过Milipore的,虽然我确定是能用的,但是颜色太淡了,发文章没法用的,建议用Sigma的吧。
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发表于 2011-12-2 16:00 |只看该作者
回复 Yedan 的帖子8 P9 L; m1 N* r. n6 e. [0 h& i( V
( |: h8 B. _. l7 {
请问sigma的碱性磷酸酶染色试剂盒怎么使用.?操作过程中需要注意那些地方
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