脂质体转染

huangcong1988

回复 梓玥 的帖子4 E. `8 w( e& k- b9 F$ M; m) R
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o ,lip-2000用的时候不用吸出培养基吧？

huangcong1988

回复 牙牙丫丫123 的帖子- J/ `6 q  u  q" c- ?: Y
( D- A9 u  j4 w6 o$ r, i1 v' x
这样是不是有点奢侈啊？我用大皿养，要换成opti-MEM，那得要多少啊？15ml一换的话，那四个就需要60ml opti-MEM，是不是太奢侈了？

梓玥

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要吸的，其实只要用无血清的培养基也是可以的。只是用opti-mem，效果更好。

mansnoopy

脂质体虽然效率尚可，而且用的比较多，都是它的毒性较大，很多娇嫩的细胞经不起这样的折腾。必须一起重视，也正因为如此，它将逐渐退出历史舞台

hhxxattxs123

回复 yyshpy 的帖子
. W  d* x, f$ I7 _) c- A* O: A1 [- Y
请问！用脂质体转染干细胞效率高吗？还有其他的好的转染试剂是什么呀？转染效率如何呢？

hhxxattxs123

回复 梓玥 的帖子: c) {& {! j) {5 j. f
% j; q: D' w0 q' |' y  ~
lIp 2000转染干细胞怎么效率很低呢！不到百分子5！转染了好多次都是这样！不知道你转染的结果如何呢！

yyshpy

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3 L) Z) M( v2 ^, U2 Y+ ^% N8 c) V
& H, Y5 b! s) V5 a" x我们摸索的效果是 脂质体2000还是比较高的，好像还有一个Xfect，效果也不错，不过比较贵，你可以直接转一个 GFP试一下，就可以 的

FYH

不换液也行的 fugene6  lip2000  磷酸钙 都可以转的很好

梓玥

回复 hhxxattxs123 的帖子7 Z* {$ ^6 j. W/ n9 g0 {
- n1 }* Q* C1 ^
一般都50%-60%吧，但是也要看什么质粒了，大家手法有点不一样，像我们实验室，有的用fugene6效果好，但是我用lip2000好点

hhxxattxs123

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50%-60%这个算很高了，你们怎么计算转染效率的呢，还有就是你们的转染方法和步骤能分享一下吗？谢谢