如何才能高效转染MSC?

wateryong

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  q( W' c' p! H) f6 w& D2 i5 S/ J6 |6 Y
1、论坛上很多人都是细胞融合度达到80%左右的时候做的，我之前用的50%的融合度得到的病毒的滴度不太高，你可以用80%的融合度试试。
5 t$ q6 B* U. _$ H2、双抗对质粒的转染有影响，无双抗的好一些。+ B! Q0 |2 z( F: z5 G  n5 `0 T
3、具体的血清浓度根据你的细胞不同来改变吧。我平时用10%FBS 养细胞，后来用15%的FBS去产病毒。293细胞不用测滴度吧，如果有必要可以用去测收的病毒的滴度。我没测过，一般情况下，按照Lip 2000的说明书来做应该滴度就够，还有如果时间充裕可以做梯度测一下lip2000加的量，因为lip2000浓度高了对细胞生长有影响，说明书上的浓度一般都比较多。
: q+ r* t( |  i4 I, l. q3 K0 I4、我之前做的时候加polybrene浓度也是8ug/ml。如果你做完感染，死亡太多，建议你做一个梯度。5 @8 A! A$ I' X4 d- G+ Z; R

quge_00

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3 B3 t* c& R8 H  m; ]; J" r0 S5 b- i
谢谢解惑啊~~新手向您致敬啊~~

wateryong

回复 quge_00 的帖子; y: Y. m: |" X  Q1 `1 ~
2 o0 z6 ?2 f  S( {/ e$ V6 j
不用谢。我也是新手，细节方面多做就能处理好。共勉。

lvmaoshiwo

回复 luoziwei 的帖子$ K/ H* G, E, C& D$ d, X" G
4 P3 d- S2 q2 x! z! U7 h3 y: I
小鼠MSC能到50%？

luoziwei

mouse的我没转染过，用rat跟human的