如何才能高效转染MSC?

wateryong

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1、论坛上很多人都是细胞融合度达到80%左右的时候做的，我之前用的50%的融合度得到的病毒的滴度不太高，你可以用80%的融合度试试。! [3 X/ G" m+ |% a
2、双抗对质粒的转染有影响，无双抗的好一些。
% R( ^* H- [/ u5 y" J; O$ e3、具体的血清浓度根据你的细胞不同来改变吧。我平时用10%FBS 养细胞，后来用15%的FBS去产病毒。293细胞不用测滴度吧，如果有必要可以用去测收的病毒的滴度。我没测过，一般情况下，按照Lip 2000的说明书来做应该滴度就够，还有如果时间充裕可以做梯度测一下lip2000加的量，因为lip2000浓度高了对细胞生长有影响，说明书上的浓度一般都比较多。
# k  _3 v- `4 m4、我之前做的时候加polybrene浓度也是8ug/ml。如果你做完感染，死亡太多，建议你做一个梯度。
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quge_00

回复 wateryong 的帖子: E5 _- y( p% j* h7 d/ u

) X$ \4 `5 J7 E! F; o谢谢解惑啊~~新手向您致敬啊~~

wateryong

回复 quge_00 的帖子6 E% s2 C4 W$ `( o, J$ e0 n
3 U" U: G( ]" A# ^. J! s
不用谢。我也是新手，细节方面多做就能处理好。共勉。

lvmaoshiwo

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  F9 i& r+ ^; E9 F' c4 x
0 t8 `7 n5 G/ a2 X0 x5 G小鼠MSC能到50%？

luoziwei

mouse的我没转染过，用rat跟human的