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楼主: namulow
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[其他类别] 干细胞标记及追踪(专题讨论)   [复制链接]

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发表于 2011-12-4 01:20 |只看该作者
磁性材料标记追踪:
, z  x# `* J+ r' s6 i5 c磁性标记用于追踪受标记的移植细胞在体内的运动信息,从而得知移植细胞的未来命运。通过MRI技术对干细胞进行可视化和追踪,需要将干细胞进行磁性标记以便它们能与其它组织有所区别。(superparamagnetic iron oxide particles)SPIO相当于MRI造影剂,方便追踪。但是SPIO可被降解、代谢, 一般经过5-8个细胞分裂周期后就会消失。
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发表于 2011-12-4 01:21 |只看该作者
Y染色体标记细胞追踪移植细胞技术 选用雄性供体和雌性宿主,利用Y染色体作为标志物,最大的优点就是标记技术简单,而标记效率很高,利用FISH技术进行追踪标记的细胞能清楚的观察到。适合长期体内试验定量分析,但是FISH检测技术比较复杂
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发表于 2011-12-4 01:37 |只看该作者
另一种长期标记方法:人MSC回植动物体内,检测HLA,与Y染色体标记相似吧
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发表于 2011-12-4 01:44 |只看该作者
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本帖最后由 namulow 于 2011-12-4 01:45 编辑 ! ]2 |$ N8 ?. u; v! M& `1 D/ ~

! h+ T5 P- _- E回复 namulow 的帖子
1 A/ p$ \* E7 Q1 I0 E0 H8 S+ s
) V3 m" N( [9 x The BrdU labeling signal quickly decreased over time. Thus, BrdU should only be used to temporarily label dividing cells. . V- B& w* f2 a3 n5 z& M
DiI and FISH labeling may be used to steadily trace cells during invivo experiments.

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发表于 2011-12-4 02:07 |只看该作者
回复 manybit 的帖子
) j% m- R. j; t( c  I" L0 K
" A- F8 T* M" a7 E) a: p' _SPIO可被降解、代谢, 一般经过5-8个细胞分裂周期后就会消失。
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发表于 2011-12-4 02:45 |只看该作者
DIL BrdU FISH三种标记方法随传代而发生的标记率变化
; Y, A  Z/ D8 e( ]& r$ l R(7T%~A}V%RMSX}_V20E%3K.jpg
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发表于 2011-12-4 02:53 |只看该作者
222.jpg

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发表于 2011-12-4 10:43 |只看该作者
在我们研究的领域里,用来标记干细胞的方法一般有Brdu标记滞留,特异性表达在干细胞上的膜蛋白、核蛋白。追踪这些分子的变化可以用来追踪干细胞在在体中的变化。像楼主想追踪外源的细胞在在体中的变化情况的话,只要标记好了这些细胞就可以了,我觉得最好是从基因组水平去标记,像GFP片段的整入,这样的修饰可以确保信号的强度不会减弱。而像Brdu、Hochest会随着细胞的分裂增殖而导致有一部分细胞信号的丢失。
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发表于 2011-12-4 19:01 |只看该作者
以上说法各有各的理,不过我的意见是GFP 是个金标准。
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发表于 2011-12-4 19:02 |只看该作者
以上说法各有各的理,不过我的意见是GFP 是个金标准。
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