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[请教] 有用荧光标记二抗做Western blot 的吗? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-12-5 10:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教用荧光标记二抗做Western的实验方法和技巧?先谢谢了!
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沙发
发表于 2011-12-6 13:55 |只看该作者
没用过,不过我觉得如果你买了荧光标记的二抗,说明书上应该有相关的技术指导吧,其实我觉得应该和普通western一样,只是最后一步的检测方法会有所不同,我想不到你怎么去检测?有专门的检测仪器吗?我只知道他们用化学发光发去检测的,可这种需要激发光还真没听过!
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藤椅
发表于 2011-12-7 08:42 |只看该作者
回复 亮亮燕燕 的帖子/ D& a' I* T# _, g" V, w: F
* b4 T2 \5 q5 D2 c( z+ g
其实和化学发光是一样的做法,只是最终检测的时候,需要用特殊的检测仪器,我之前是采用奥德赛检测。
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专家 优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2011-12-7 08:51 |只看该作者
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荧光应该没有态度区别,只是检测方法和灵敏度不同而已。 应该灵敏度较低。
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报纸
发表于 2011-12-7 13:41 |只看该作者
如果你实验室用荧光来检测蛋白的话,应该可以吧,但是按照常规的都是HRP标记的,荧光的只能用看荧光的方法来看。以前我一个小师妹用荧光的做过,我说他做100年也做不出来,因为她最后用的方法是DAB显色。。
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地板
发表于 2011-12-9 04:27 |只看该作者
应该就是最后一步检测的方法不同吧。。
  p. V+ f* H4 V7 l1 H1 o* J6 a但是我没做过。。
* g; g" F2 x2 F( K' \# J- o4 a/ J一般只用HRP标记的二抗。。
% Q! r9 {# q+ ?' j( c
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发表于 2011-12-19 09:45 |只看该作者
谢谢大家
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