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楼主: langziforever
go

[请教] 关于人全长cDNA的获得   [复制链接]

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包包
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发表于 2011-12-7 12:46 |只看该作者
KOD的酶很好用 实在不行分段克隆吧
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发表于 2011-12-7 17:03 |只看该作者
回复 ndwzf 的帖子
6 v7 I) E8 [' _6 C. r; x
! ^- x: q. r% Q' w9kb....肯定得用lenti的载体了,FUGW吧& i) r( g: O- E
至于酶,你问下Roche的人,他们有P长片段的,我用过还行,名字我记不清楚了...3 q0 P2 [; I& Q# a
如果实验室有Taq和Pfu,可以1:1混合用,这样也可以做的,P长片段我经常这么干,但是别跟老板这样,会挨骂的...
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发表于 2011-12-8 19:57 |只看该作者
回复 spchsq 的帖子
0 [2 B+ y$ E% ]) k0 g- d: a& T# @, ~5 X) w" B% N" P
怎么要呢?

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发表于 2011-12-8 21:57 |只看该作者
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回复 hndxws 的帖子: e) W# f; n5 ~5 B$ r3 M) H

  G4 w$ o) d9 I真不错,谢谢!

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发表于 2011-12-10 10:38 |只看该作者
回复 ndwzf 的帖子
) X6 i# i7 V* e/ s5 ?6 t! G9 G0 U8 `( S  ?  \  W
看前面hndxws的贴子上有链接

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发表于 2011-12-17 09:57 |只看该作者
回复 hndxws 的帖子! z4 x" X0 W5 @) l! S5 K7 O
1 r3 [7 a: t9 D! [
我也想告诉他这个。
& J5 ?7 q+ C) Z6 J你抢先了。
2 z- x+ Y) _, s& H1 L$ A" ^其实自己扩也是没问题的
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发表于 2011-12-19 19:56 |只看该作者
谢谢大家,也谢谢这位韩教授,希望国内的所谓科学家们多发扬这种真正的科学精神!

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发表于 2015-6-18 15:36 |只看该作者
你好,我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA,后续想做过表达,但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方,想跟您请教一下。" T+ l  d! e( [8 Q  D. R7 I
首先,这个菌液的载体信息我没办法获得,怎么进行测序呢?
/ E" C% _  L2 [其次,没有载体信息,我如何设计空载体进行对照呢?
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发表于 2015-6-18 15:41 |只看该作者
你好,我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA,后续想做过表达,但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方,想跟您请教一下。
7 _2 _8 u3 _8 B# O* I3 W 首先,这个菌液的载体信息我没办法获得,怎么进行测序呢?' E  W" u! K% e+ D! D/ y* E
其次,没有载体信息,我如何设计空载体进行对照呢?

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发表于 2015-6-18 16:32 |只看该作者
你那个基因有多大,做全基因合成呢?Life tech 好像有做
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