关于人全长cDNA的获得

不倒翁

KOD的酶很好用 实在不行分段克隆吧

Yedan

回复 ndwzf 的帖子
  J; N; H2 f* J) Y6 p; u/ U6 ~  G3 S# l% Z
9kb....肯定得用lenti的载体了，FUGW吧
' o2 Z' m" J8 o" f( F至于酶，你问下Roche的人，他们有P长片段的，我用过还行，名字我记不清楚了...
8 W/ f2 ~: V  X8 _5 A, d如果实验室有Taq和Pfu，可以1:1混合用，这样也可以做的，P长片段我经常这么干，但是别跟老板这样，会挨骂的...

ndwzf

回复 spchsq 的帖子! C9 d( y& n6 h9 A
7 H0 t9 S! i; I6 D( [
怎么要呢？

zhangxl85

回复 hndxws 的帖子# A! \+ k$ y& O& v6 P, q
+ ~) T5 T2 B1 F# f+ s
真不错，谢谢！

spchsq

回复 ndwzf 的帖子8 u4 C! W/ J* C; [0 S% ~4 e
4 `& l2 f! S; C/ w2 J& K0 R
看前面hndxws的贴子上有链接

zhuyin2010

回复 hndxws 的帖子
" u6 W$ o* m! G& V7 e* M
; I: s1 q1 f: B9 u0 p我也想告诉他这个。
, w" r& e% a4 O& ]. A! X你抢先了。; B2 {  V% k" S; [$ a
其实自己扩也是没问题的

langziforever

谢谢大家，也谢谢这位韩教授，希望国内的所谓科学家们多发扬这种真正的科学精神！

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。! l" ~) t3 E7 `: Y
首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？% Z3 ~" q- R' c/ T& R, G
其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。: `) Z! }3 x: L/ [$ I8 G
首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？
8 b2 L( w$ @8 K6 J- W% v 其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

yuanyecat

你那个基因有多大，做全基因合成呢？Life tech 好像有做