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楼主: langziforever
go

[请教] 关于人全长cDNA的获得   [复制链接]

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包包
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金话筒 优秀会员 美女研究员 新闻小组成员

11楼
发表于 2011-12-7 12:46 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
KOD的酶很好用 实在不行分段克隆吧
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12楼
发表于 2011-12-7 17:03 |只看该作者
回复 ndwzf 的帖子( L. z. r( |. C2 s: Y, w

. T. U5 w% M0 q9 l7 l8 ]9kb....肯定得用lenti的载体了,FUGW吧
( Z1 g. e( ~; o至于酶,你问下Roche的人,他们有P长片段的,我用过还行,名字我记不清楚了...
9 z1 N( F$ Z/ D6 t' O5 _  ~如果实验室有Taq和Pfu,可以1:1混合用,这样也可以做的,P长片段我经常这么干,但是别跟老板这样,会挨骂的...
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13楼
发表于 2011-12-8 19:57 |只看该作者
回复 spchsq 的帖子/ L! c& n: U  |8 |! o$ B
$ N+ I2 i5 L% Y" G
怎么要呢?

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14楼
发表于 2011-12-8 21:57 |只看该作者
回复 hndxws 的帖子
; N5 X$ e8 R9 W" B/ q! u, G) a% K0 F/ z1 V
真不错,谢谢!

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15楼
发表于 2011-12-10 10:38 |只看该作者
回复 ndwzf 的帖子
  V/ Z+ s6 D5 G9 o( H/ {4 ?* [0 f
看前面hndxws的贴子上有链接

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16楼
发表于 2011-12-17 09:57 |只看该作者
回复 hndxws 的帖子( }% E/ V/ ]4 x1 `, E

! U9 Q- H/ c7 P8 C1 G9 J我也想告诉他这个。
- g: d; `9 r2 Z7 Q# G* Z你抢先了。
% `& X1 m1 m  |0 Y其实自己扩也是没问题的
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17楼
发表于 2011-12-19 19:56 |只看该作者
谢谢大家,也谢谢这位韩教授,希望国内的所谓科学家们多发扬这种真正的科学精神!

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18楼
发表于 2015-6-18 15:36 |只看该作者
你好,我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA,后续想做过表达,但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方,想跟您请教一下。4 Z! f4 Y# {; |2 B7 a4 W1 c- n
首先,这个菌液的载体信息我没办法获得,怎么进行测序呢?
- S" [8 e( C$ C6 q& Q3 Z  M其次,没有载体信息,我如何设计空载体进行对照呢?
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19楼
发表于 2015-6-18 15:41 |只看该作者
你好,我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA,后续想做过表达,但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方,想跟您请教一下。
1 `3 j' p9 m0 p# M 首先,这个菌液的载体信息我没办法获得,怎么进行测序呢?/ Y4 H8 z7 |0 J' C( t4 j% z
其次,没有载体信息,我如何设计空载体进行对照呢?

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20楼
发表于 2015-6-18 16:32 |只看该作者
你那个基因有多大,做全基因合成呢?Life tech 好像有做
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