关于人全长cDNA的获得

不倒翁

KOD的酶很好用 实在不行分段克隆吧

Yedan

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& Y0 h6 }' ?" b6 j7 D
8 G3 t* T2 g6 q! Q: l0 \+ N! a$ L9kb....肯定得用lenti的载体了，FUGW吧# ?0 V( d+ M  v# _" D
至于酶，你问下Roche的人，他们有P长片段的，我用过还行，名字我记不清楚了...
  a* S. {. T& J3 [如果实验室有Taq和Pfu，可以1:1混合用，这样也可以做的，P长片段我经常这么干，但是别跟老板这样，会挨骂的...

ndwzf

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/ e4 M4 B  ^0 R9 B$ V8 I' M* G2 b0 a/ c6 b4 b7 n
怎么要呢？

zhangxl85

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, e0 X* A0 y: F  ~4 Z% z! u2 N) I/ y' E8 y. t
真不错，谢谢！

spchsq

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9 K3 t% ]! F5 z: S5 g: v0 W. e
9 S1 }! [* s8 z- R" d7 d看前面hndxws的贴子上有链接

zhuyin2010

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3 M$ X* G& T3 b( ]" O
% {! [3 T0 U, z3 [4 V2 ^我也想告诉他这个。
1 A; E' T" Q. e/ E( @你抢先了。
- C' N) a: [/ _  d0 Y6 J- X* c其实自己扩也是没问题的

langziforever

谢谢大家，也谢谢这位韩教授，希望国内的所谓科学家们多发扬这种真正的科学精神！

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。
2 ~* w, f/ ?! o$ b首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？* Y# z( g+ v" Q( `4 p) E6 @% m& M
其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

莫大山

你好，我刚向韩家淮实验室索取了一个cDNA，后续想做过表达，但是关于这个菌液我还有一些不懂得地方，想跟您请教一下。, k1 y4 M+ \: R1 a3 m" H# X
首先，这个菌液的载体信息我没办法获得，怎么进行测序呢？- H8 t& q1 L) V
其次，没有载体信息，我如何设计空载体进行对照呢？

yuanyecat

你那个基因有多大，做全基因合成呢？Life tech 好像有做