关于无血清培养基问题 - 脂肪干细胞专区干细胞之家

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优秀会员

楼主

发表于 2011-12-13 21:17 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

近期准备使用无血清培养基培养细胞，不知传代时如何终止啊！恳请高人指点。

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沙发

发表于 2011-12-13 22:02 |只看该作者

没有做过无血清培养细胞，一般咱们用培养液来终止消化细胞也是利用培养液中的血清，所以我个人认为胰酶消化后直接加血清终止就可以，离心去上清后可以用无血清培养液来洗一下以彻底洗去残余的血清

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eileenyangliu

新手上路

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藤椅

发表于 2011-12-13 22:06 |只看该作者

还有无血清培养的话，培养液里应该有血清替代物吧，也应该可以直接用这个无血清培养液来终止消化

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aulenuyah

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金话筒优秀会员帅哥研究员积极份子小小研究员

板凳

发表于 2011-12-14 01:22 |只看该作者

建议楼主去查一下说明书，应该有的。是不是加钙镁会有用

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wangzhiqi86

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金话筒优秀会员

报纸

发表于 2011-12-14 08:50 |只看该作者

不知楼主为何选择无血清培养基来养细胞，是要驯化吗？如果是的话，那就不要一下把血清全部去除，按照一个梯度，慢慢下调血清含量，细胞需要一个适应过程

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zhpeng07

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地板

发表于 2011-12-14 08:52 |只看该作者

终止消化可以用胰酶抑制剂，这个有几个大公司都有卖的，sigma好像就有!

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WAX

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优秀会员

7楼

发表于 2011-12-14 09:29 |只看该作者

消化后，可用10倍体积的PBS稀释离心，不要用含血清的培养基。

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momocy

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金话筒优秀会员美女研究员

8楼

发表于 2011-12-14 09:53 |只看该作者

是这样的，无血清培养基不会终止酶的消化，需要用培养基洗才能把酶洗掉，我见过的是克隆的传代，就是消化结束后加入培养基洗一遍，等克隆沉降，然后吸去液体，然后再加培养基，同样地再吸去，再加入新鲜的培养基就好了。不知道你的是什么细胞，若是单个细胞，加入培养基直接离心就可以了。

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rongrong

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9楼

发表于 2011-12-14 10:03 |只看该作者

我们实验室用得是细胞中和液终止消化的，是Gibco公司的TN,货号为775019，这个避免血清的使用对细胞状态有影响，希望对你有用

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suning5