求助：诱导胚胎干细胞突变

yylhxylong

想请教一下各位：
5 ?/ m5 o8 b% B; Q0 L- S$ y- ]9 A       在使用小分子诱导胚胎干细胞突变的时候，是先加小分子，同时使用lif+2i media 来培养，在培养两天后是换成不加2i的meidia 还是一直使用lif+2i？

zpzp0312

只要ES细胞不是来源于难于培养的品系
# v$ _: Z1 G% l% a. j+ t- m那么，2i的添加不是必须的？3 r1 ^/ l$ n$ u9 C* B
另外，请教一下，2i是哪两个抑制剂？怎样溶解的，浓储液的浓度和使用终浓度分别是多少啊？
+ ?& S  ^- _8 w8 S5 T3 U) Z请教

yylhxylong

回复 zpzp0312 的帖子# S, E: I* G" O/ o

# j, ?4 i# R! ^  U2i 就是CHIR99021（抑制GSK3）和PD0325901（抑制MAPK和FGFR），浓度的话貌似是1ug/ml 和 3ug/ml?

zpzp0312

回复 yylhxylong 的帖子8 p3 Z4 y  b$ ~7 V
6 p$ d+ ~- [* M; A' J
这两个抑制剂都是2mg的包装是吧？
/ o- f; l  B+ p用多少DMSO溶解的，我忘记了