传代后贴壁细胞只有一半。为什么？

cortex

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2 a1 ?( `+ P0 [, \这种问题一般在两个方面：一是出现在自己操作上的问题。1 胰酶浓度高了，或者消化时间长了。1分半时间不长。你可以这样处理：稀释胰酶，或者缩短消化时间，不要等到所有细胞都消化下来，大部分细胞消化下来后赶紧中止，吹打或拍瓶，细胞都能下来。2 考虑包被瓶子，用明胶就可以了。二，如果不是上述问题，可能是你的细胞不纯。按理说比率怎么那么高，那么多细胞不贴壁？当然，这些不贴壁的细胞最好把它们处理掉，万一是死细胞，肯定影响你的细胞状态。也有可能是细胞老化或者分化，这个不是太懂。

suning5

原代细胞不纯的问题。

luckywen

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我用过GIBCO的胰酶，没写浓度，直接加发现细胞成片脱落而不是独立分离，效果不很好。建议试试换0.25%的胰酶。

天枰2012

回复 meister 的帖子8 V, j$ n9 z3 n  Y( {7 H

' n! {3 }$ W- U8 D请问是不是就像做细胞爬片用明胶包被 一个道理？如果可以的话，那不是用明胶包被也行嘛，都是为了让细胞容易贴壁？谢谢

新疆八钢

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1.原代细胞不纯，部分细胞贴壁能力较弱，非间充质干细胞. [! \9 \* `6 ?' A7 S3 \
2.如果传代后仍旧如此，估计胰酶消化有问题，可降低胰酶浓度试试。
) |& L6 j" f/ t+ v% g' g3.胚胎骨髓间充质干细胞较为脆弱，离心转速降低为1000rpm,3分钟，可能离心不充分，你可以适当调整。

meister

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是的， 明胶就是Gelatin