关于组织消化过夜的问题 急急急！！

759512199

用二型胶原酶消化组织过夜是不是要加DMEM和FBS的？1 {: Z/ P) r$ M! `; a# ^
如果用dispase呢，会不会被培养基血清终止掉？3 O' h' [( Z* x$ j& S
各位大侠指点下啊，急急急

king8

根据以往经验，二型胶原酶消化组织过夜，DMEM和FBS可加可不加！
, _, R* ]% D- g1 A8 M' C用dispase不会被终止掉！如果加dispase，对接下来的细胞培养会有比较好的帮助

meister

回复 759512199 的帖子% s7 m) Q6 |3 @) R

  B8 a2 p" Y2 P胶原酶不会被血清终止。
; r$ \3 Y7 i: l0 q9 I/ \' ?但是血清影响胶原酶效率。
1 b  r$ g7 s( |1 l3 V过夜消化不建议。时间太长。- B% @* ?: `1 u% p/ }$ H
长时间消化建议应用基础培养基即可。

xiaoyurly

回复 759512199 的帖子2 d" Z0 D8 o. `1 c) g9 a  r, j
. p( Q+ D* J# j6 v3 [6 ]5 f
II型胶原酶消化过夜不太好，血清存在会影响其消化效率但不能终止，dispase属于比较温和的酶，我们倒是用过过夜消化，但是不太推荐。一般除非组织很难消化，否则不建议做过夜消化。

liluli0715

胶原酶对细胞的伤害比胰酶小，有文献报道可以消化过夜，我们实验室消化3cm组织，3-4h就可以消化完，如果是胎盘消化的更快，没必要过夜消化呀

759512199

回复 king8 的帖子( R. V1 v& N/ j8 X& ^

2 D* f* q9 t! T5 Z- ?dispase消化皮肤的话2g/L会不会太大了？

759512199

回复 meister 的帖子
: E0 t' v, W$ R2 w1 c' X* C- @8 [; J$ q' A
我是打算dispase消化皮肤提取汗腺呀，dispase比较温和，估计要消化过夜的，不加DMEM,FBS细胞会不会挂掉啊

759512199

回复 xiaoyurly 的帖子
  s( g: ^7 q2 g  `
) W  C! a0 ~6 Q# o" |$ R' x/ Fdispase消化的皮肤，估计不太容易消化。你的dispase消化过夜加了血清没？多大的浓度呀？

759512199

回复 liluli0715 的帖子1 X# ?3 A6 B1 q* q2 \5 e7 J

# r) t5 G+ j/ J我是消化皮肤提取汗腺，胶原酶还没买，医院的皮肤已经就位了，所有打算用dispase试试，估计要消化过夜

meister

回复 759512199 的帖子8 R& ?$ _6 G* A' G, |# U7 L1 o

; L3 O+ y: ]2 W+ B% M9 N/ G加ＤＭＥＭ，不加血清》
1 O8 t/ u% p" O; t+ L: K6 U基础培养基ＤＭＥＭ。