关于脐血分离的问题

HHvivian

还是只用Ficoll 所达到的效果好？
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细胞海洋

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HHvivian

好的

lixuejia

        脐血中UBMC的分离想通过一次FICOLL离心完全除去红细胞是不可能的，因为脐血中会存在一些幼稚的红细胞（网织红细胞)，这些细胞会不可避免地有部分细胞难以完全和UBMC分开，而且，由于脐血的新鲜程度、样品间差异等原因，离心后分层的效果也有很大差别。3 J- F  j6 m) M7 m; ~, {. \1 h
       红细胞裂解法可以出去大部分红细胞，是一种较为有效的的方法。但是，红细胞裂解后UBMC的冻存-复苏后回产生更多的絮状沉淀，而且裂解是否对后续HSC体外操作有影响，也需要去仔细评估。
& p3 b7 K5 X! t     此外，个人认为，多洗几次只能将血小板除的更干净一点，对红细胞的减少似乎效果不明显。7 Y0 W4 a. b0 D* G' r8 j- i
   

zhuhaoyao

按5：1加上HES，然后低速离心，去除上清，再高速离心一次

448922239

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- j9 k: U3 D7 ]8 T, E$ d+ A  T) G0 X# k  x$ z
低速，高速离心力是多少啊？？？

zhuhaoyao

回复 448922239 的帖子0 n& D4 ?6 k( G" X+ X- Q

1 v6 Q0 F+ P5 A1 |* I6 V9 o低速50g,高速120g

禁虚度

我建议先用HES分离上清液后再FICOLL分离，效果可能会比单一用的要好

细胞分裂

红细胞多跟很多因素有关系，跟血液本身也有关系，要是你离心是一般用的转数，应该不会有太大问题，和本人操作也有关系，血清中肯定会有红细胞，如果太多，把上清吸掉，多用盐水洗几遍就好了。至于用什么离心，要看你做什么实验了，以前我用ficoll,现在用HES。

ywx6302706008

有一些也没有关系的啦，如果非得去掉的话，就用红细胞裂解液吧