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关于脐血分离的问题   [复制链接]

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包包
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小小研究员

楼主
发表于 2011-12-21 22:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我想问下在脐血分离离心后,能看到有明显的红细胞分离下来,但是上清中还存在一定量的红细胞,我想再多去掉红细胞,是吸取上清再离心还是直接继续离心,感觉吸取上清后再次离心和不吸取上清留在原来的离心管中离心总有什么差别,但是具体说不出来,所以想问问各位老师。谢谢~~~
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沙发
发表于 2011-12-22 08:22 |只看该作者
你应该是分离脐血单个核细胞吧,脐血往Ficoll里加的时候未搞好或者你的离心参数没设置好,导致上清中还存在一定量的红细胞。! k  {) B6 c3 E. p
你只需要吸取中间的白细胞层就可以了,肯定会带有红细胞,再加盐水洗几遍,加裂解液裂解红细胞就可以了。
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藤椅
发表于 2011-12-22 13:40 |只看该作者
ficoll分离做的好的话,基本不会有多少红细胞, 应该小于3%,或者更低。如果肉眼可见,则是操作或者试剂的问题。
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板凳
发表于 2011-12-22 17:53 |只看该作者
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+ ~( S/ p4 r6 d7 f" `! f$ u
7 W( Q9 Q# u% z8 Z& d$ I: a9 v$ r( v* i我们用得是羟乙基淀粉分离的,ficoll分离以前试过但是分离出来的单个核细胞没有HES分离的多。
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报纸
发表于 2011-12-23 08:48 |只看该作者
回复 448922239 的帖子
6 A: x* c1 J' o  F! ?7 Z+ g5 b0 Y! O6 g4 |  w4 }
羟乙基淀粉分离,红细胞肯定不完全。
9 n  R% w0 X; @" O6 h分离效果ficoll不会比羟乙基淀粉低,看操作。- d2 N% @! s# x' b" @0 E/ w/ H6 s
羟乙基淀粉分离用于建立细胞库。
0 ^4 F6 @8 U, Jficoll分离用于实验研究。
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地板
发表于 2012-1-7 14:46 |只看该作者
ficoll分离比较经典,但是HES分离效果跟好些。
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发表于 2012-1-11 09:58 |只看该作者
f我建议还是提出后再用注射用水吹打下,应该会好些。
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发表于 2012-1-17 16:34 |只看该作者
要是感觉红细胞多的话加些裂解液。继续离心。
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发表于 2012-1-18 11:35 |只看该作者
离心后上清中肯定是有红细胞的,我建议在适合的范围内调整离心力,这样效果就明显了,不用去上清,或者静止一段时间,如果上清中有大量红色物质,则可能是溶血,上面说的是储存,如果临床使用,只能是吸取中间白细胞层,然后用生理盐水清洗,在保证细胞数的情况下,多洗几次。。
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发表于 2012-9-25 11:24 |只看该作者
Ficoll  加上甲基纤维素从脐带血中分离单个核细胞,效果好吗?
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