脐带间充质干细胞不贴壁

wind789

meister 发表于 2011-12-27 14:11 " W7 |. r# O6 b9 T/ v8 |
回复 youtellme 的帖子( z1 T" k. x* {
- `# S0 J: R2 i* J: E
组织块不贴壁，是操作的问题。 加入组织块后，不要加入培养基，孵育30分钟左右，然 ...

+ Z. r: l9 @# z; B8 [组织块不用贴壁，细胞慢慢会贴壁的，只是速度慢点。

meister

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6 b% t% \, a: `' Z& t8 T( J6 J1 T* J
这个概念是错误的， 如果组织块不贴壁，由于组织块和培养皿之间的间隙，细胞爬出困难。在操作中组织块移动会导致分离失败。

leungyk

組織塊要貼壁，細胞才會爬出來
2 u( C* S! J# z" V: O要組織塊貼壁，上面已有學長提過，我的方法也是跟這兒的學長學習的，再加以改良：( D1 Q0 i3 ?* r  U: v0 B$ v7 M' K
放好組織塊，閒置數分鐘，以35mm2 culture plate為例，慢慢放入500-600ul之培養基 (足夠令組織塊不會變乾就好)，一天後再加至1ml 左右，要很有技巧地加，不要動到組織塊！加多了的話，很易浮起！

wind789

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0 V* T8 N) p" G2 _5 `
% y( G6 }  {  I$ ]( m同意。% m6 k& M2 p5 @! k. m: D
可能我的意思没有表达清楚，初始组织块悬浮不贴壁，过段时间慢慢会沉下去自己贴，随之细胞爬出。

yanlu98

是原代的吗？会不会是消化的问题啊？

shashou_com

间充质干细胞有很强的贴壁特性。8 w) E4 b$ E! W
如果不贴壁，还是脐带间充质干细胞吗？
) d+ Z$ Z" Y2 T/ U因子和培养基应该不会有很大的影响。

快乐成长

回复 yuwenlan 的帖子: @' `" {) P* s! O$ J1 u" I/ G

- {  U1 h* I  F2 ?组织确实不贴壁，本来先将组织一点一点种上去，十五分钟左后加入培养基，刚开始还好，过了一两天就不行了，手稍微动一下，就会晃动，如果培养液加的少就在表面滑动，如果加的多直接就漂起来了。很难过。用的是国产的L-dmem和听卖家说是澳洲特优级FBS，瓶子上是GIBCO 12657011，我没有在网上找到。还请给建议谢谢。（胶体处理没问题，以前做过，只是不知道培养基是什么东西，现在自己做，还在寻找合适的培养基）

Demon_CN

看楼主的文字，以前也养过,不过好流程貌似没学全,建议把自己的流水线再梳理一般,从采集，保存液,分离关键点,培养条件---温度湿度二氧化碳。排除下原因

babyrose66

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8 W/ a2 f6 X) Y, N$ s5 y. Z0 ^- l; k" y: p2 H
亲 现在还记得细胞怎么贴壁的不，我现在就做的这个细，和你当时的情况完全一样，就是不贴壁啊 ，你最后是怎么让细胞贴壁的 ，采取什么措施了吗

细胞海洋

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