怎样培养无feeder的小鼠胚胎干细胞？

lindan666666

我们都在做小鼠ES细胞哦，在MEF上长满后传到经过0.1%明胶处理过的48孔板上，克隆形态很好哦，用的都是加了LIF的ES细胞培养液哦。你先0.1%明胶处理20分钟，ES细胞消化好后直接接种过去就可以啦，一定要加LIF防止分化哦

shangchunhua

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" S! o6 S. S* j/ m% s8 e) D) f/ A; L' q* t2 Y
我指的是驯化的protocol，很多文章只是提了一下，都没有详细讲的。

lixf

我曾经养过无feeder的ES，先用明胶包被培养皿，再用加2i和lif ES培养基培养就可以了
* k# @, f' E2 x但是在无feeder的环境下只能支持2代，传到第3代时候，就会有细胞分化现象。

jjjk127

同感呀，也想无feeder养，可是养不好呀，求高手指点; A0 s! C3 F# L5 T

shangchunhua

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. j% C: L1 J( Z% ?/ ~# Y: s6 X$ D3 e) R5 y: ]: M3 H0 B3 t
我分享一篇应其龙的文章吧

shangchunhua

回复 igdb 的帖子8 B9 r1 H; L& R; z/ ?# F
4 P5 f$ z0 P  O
Millpore的一个驯化的protocol，不过要用专用的培养基

小猴子2421

您好，我可以问下您的2i/lif培养基配方吗？

细胞海洋

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) o: k. O( N7 n4 H6 Y4 \* n8 e3 v
, S' B) ~. R. Q% I建议你发新帖提问

splinkerette

回复 song58 的帖子- [$ z1 R  l9 a8 ~. O9 W3 @! J

6 n+ O+ j) V2 O0 q0 a, \我也用的R1，但是直接养在gelatin上，感觉形态不是很好。请问用的什么牌子的血清呢？个人觉得血清的影响很大