人iPS照片 人iPS feeder小鼠品系的问题

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在养的人的iPS就是感觉状态有问题，克隆边缘不清晰，传代第二天刚贴壁时形态还很好，过几天就周围蔓延出薄层细胞（如图）到底是生长中的人iPS的正常状态还是分化细胞，请前辈给予分析5 P5 L/ B5 J. U5 J/ T6 P" e! I3 |- s4 u4 ^

1 O' ~- _, f3 v/ [/ K7 }另外我使用的feeder小鼠品系的CD-1，而非CF-1，是不是我必须要用CF-1 细胞才能长好呢
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两个问题，请尽量给予明确回答 感激不尽

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回复 573639471 的帖子8 l7 k2 n0 x% H3 {/ D
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hesu1105

你这个是用什么细胞诱导的呢，诱导因子是什么啊？请说的清楚点，这样我们好帮你分析啊，还有你这是用成体的还是用胎儿做的呢，从照片上也看不出来这些结果啊？是吧。

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回复 hesu1105 的帖子3 K: j6 M6 F, o' F, g2 J4 f
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我是购买的6个因子诱导的

ly200101042

FEEDER的品系和细胞的生长还是有些关系的，我觉得刚开始养还是用CF-1比较好。
' S4 D* [! g# z6 J% R另外 我觉得那些往外延出来的细胞，如果是传代后的第一天或者第二天可以先养养看看吧

wangyimei

你这个是ips细胞吗，貌似看着有点奇怪啊，有点像是部分重编程的克隆，和我在诱导的时候看到的部分重编程的克隆有点像，不像是ES样的细胞，细胞状态不是很好。至于你说ips的饲养层细胞标准上人的ES确实是用CF-1的多，还是不要随便更换小鼠的品系，还是查阅一下相关文献看看都有哪些品系的小鼠可以用来做培养人ES及ips细胞的饲养层。

song58

没用过Lin28和Nanog的病毒，不好说到底怎么回事，不过，我怎么感觉这些克隆不是特别像iPS。第3张照片看上去有点像，但是我觉得包括其他克隆都有点太厚了，LZ以前或现在有养着hES吗？我觉得形态差了不少。那张边缘薄的我看着90%以上是分化的（如果那个克隆是iPS的话）。
& J1 Z+ h' D$ }/ [5 {另外，请教LZ，你同时转了GFP吗？看看沉默了没嘿嘿

xxxyzw

我是购买的6个因子诱导的---请问楼主，您是在ADDGENE买的6因子吗？能否交换或赠送，或是购买，联系xxxyzw@126.com，谢谢。祝您实验顺利！

sino85196488

从图片上来看，克隆确实有点奇怪，不是很想iPS的克隆，当然不排除是feeder影响了iPS的形态。国内外的许多的研究都证明了CF-1是最适合人ES生长的，我们在诱导iPS时也是使用的CF-1，在你的细胞不是很多之前，技术不是很完善之前，还是多看一些文献来帮助。一是可以看看iPS是不是有问题，另外就是看看feeder的影响到底有多大。个人经验feeder对ES细胞的状态影响是很大的，对iPS的影响可能也会比较大。

Jonathan

一看就知道不是hIPS了。lz好好自己再琢磨一下吧。