脐带间充质干细胞的贴壁分离方法

xuzhijuan1989

回复 askage 的帖子. L/ W! M+ P) G, w) d2 K

  f7 @8 M3 O* U% ^" k你好，请问你用酶解法分离过期待MSC吗？具体怎么操作呢？胶原酶消化多久啊？用多少um的滤网过滤呢？貌似很难过滤呢，粘粘的

xuzhijuan1989

回复 king8 的帖子. a2 _8 r" s9 [* b5 H) m, Y

$ T4 ]# P  e7 n, B& {你好，能请教下你的酶解法是怎么做的吗？具体的操作方法怎么做呢？酶要消化多久，用什么过滤，消化之后的液体貌似很粘，不好滤过，请问有什么办法可以解决，谢谢啦！

细胞海洋

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0 Z# R$ H+ }1 b3 S# G* }
- T/ y% ]7 k$ {# g- U, i7 ~建议你发新帖提问

yanwu_1

酶法和组织块法的最大区别，应该是成功率吧。酶法的成功率不稳定，消化的好，2-3天就传代，很多时候都没有细胞。组织块法成功率九成以上。

deshenglll

组织贴壁法比较方便，成本较低。适用于大规模生产。酶消化操作时间较常，成本高，更适用于科研。

bings214

回复 yanlu98 的帖子* a7 k  ~0 ~. b& `* D
' [* f5 q  }/ |) K
但是酶消化法，细胞的生长率不佳吧，有些经过胶原酶消化后都没有细胞生长的。你做的情况是怎么样呢？

湖南干细胞

回复 单个核细胞 的帖子
: z  P3 D/ K& g4 A% G- {/ w5 F+ x% L, m+ w% d7 [# b$ u' M+ [+ G4 }( T
请问那种能在离心管里剪碎组织块的剪刀全名叫什么，规格是？

湖南干细胞

回复 哇牛 的帖子, E1 `6 f) V* F" |# v

, ]" @, [# c) _3 r1 Z9 D这篇文章我在PUB上没看到，请问可以上传看看不？

孙帅帅

个人认为贴壁法比较好掌握，养出来的细胞也不错。
5 ~( Y, e- }2 V3 d# G（1）、去除脐带动脉、静脉和脐带粘膜，分离华通氏层，剪成1mm3的小块。在剪切过程中可以适当的加几滴培养液以保持细胞湿润。  k: l$ e1 O" d( c
（2）、将组织小块平铺在培养瓶底部，间隔5mm左右，放置2~4小时后，加少量培养基培养（加入的培养基最好刚刚没过组织块）加入培养基时动作尽量要轻，不要让组织块漂浮！

单个核细胞

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9 H/ B" X  w" |7 c3 B' e7 O, O$ a* N% P  @( X* @: O
组织剪，弯头，16cm