脐带间充质干细胞的贴壁分离方法

2013sp

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$ y+ o3 F( ]' d/ r
; ?' v" l+ ?. _我使用贴壁法一直未得到足够的脐带间充质干细胞，故求酶消化法步骤，跪求！！！非常感谢！！！

细胞海洋

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  E8 n0 b4 s: b8 u5 o& a9 P* p
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罗裙漫紫蝶香

回复 单个核细胞 的帖子: Y' |, v- [. d/ M$ v$ z# i

8 J4 O) }- i& j/ r; }& F. w图片看不了呢，捉急' Q( S1 k) {6 _

shuimiao327

用组织块贴壁法，没用过酶消化法，贴壁法操作简单，酶消化法会对细胞造成伤害

Diane0321

2 n; o; ]4 N9 h8 u) p+ `
组织块培养法：将剪碎的组织块均匀铺于六孔板中，间隔1-3mm即可，倒置六孔板中，放入孵箱1.5h左右取出，见组织块已经粘附在培养皿底部，延边缘缓缓加入培养基，注意一定不要将组织块冲起，要让培养基逐渐蔓延整个培养体系，放入培养箱，3d后上镜看，如果有细胞沿组织块边缘出现后可以间隔3天换液了，等到组织块周围细胞呈集落生长，可以传代了。& S* H0 f- R3 B* B( v

晗晗

我觉得贴壁法挺好的,反正各有各的好处,酶消化法时间短,但是如果你没消化好就完啦,贴壁法比较慢,但是效果挺好的,你要总注意观察细胞,即时缓缓培养液什么的

shuimiao327

酶消化法操作复杂，对细胞会造成损伤，贴壁法相对操作简单，容易上手，效果好

ltickp

给别人治疗保健，我们这儿用的是酶消化法，基本一周可获得原代细胞，P1之后基本4天可以长满100mm的皿

kiss2346

酶消化法养脐带间充质还真没做过，不过个人感觉还是组织块贴壁法 好做一些，  操作简单 省心 初期稍微慢一些，传代之后生长速度还是很给力的，分离技术好的话P1代就可以很纯的

lyj-0017

回复 ltickp 的帖子1 x/ }& N1 s, b$ U

  k  ~0 @: o( U- L3 E. }你好，同学。请问你的酶消化法用的是什么酶？浓度有多大？需要消化多长时间呢？消化过程中有什么需要注意的呢？谢谢了！