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大家看看我的大鼠骨髓间充质干细胞中是不是长了脂肪细胞   [复制链接]

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楼主
发表于 2012-1-3 22:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 bnm789 于 2012-1-3 22:05 编辑 9 V. b! V9 M! Z; Y4 U; M2 B

* L! j. L8 y! {& y; p大家看看我的大鼠骨髓间充质干细胞中是不是长了脂肪细胞,全贴壁法培养,36小时换液,换液时直接吸出培养基加入新培养基,怎样避免这种情况,请各位指教
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-1-4 06:38 |只看该作者
你那些亮亮的细胞就是脂肪细胞了,我刚开始作干细胞的时候也是经常会遇到这种情况,开始都是想着怎么回事?怎么挽救? 可是根据我的经验发现一般只要开始出现这种细胞,就没有挽救的余地(当然不知道哪位牛人有没有成功过,如果ok的可以给大家传授下经验),所以后来我一看到亮亮细胞的出现就直接放弃,一般我都是多板培养的。另外出现这种情况的原因不外乎是培养液的问题,和换液时间间隔问题不大。
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藤椅
发表于 2012-1-4 09:15 |只看该作者
你可以挑选单克隆啊,在贴壁的平板上吹打吸入,再纯培养。具体的步骤要是不清楚的可以问我或查阅相关资料的,这样经过几次纯化后,就可以分离到纯的细胞系了。
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2012-1-4 10:01 |只看该作者
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看来是MSC自分化了,或是细胞不存,但是楼主可以试一下别的方法啊,比如淋巴分离液密度梯度离心
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报纸
发表于 2012-1-4 10:20 |只看该作者
你悲剧了,的确是脂肪细胞
6 K! k8 @2 o; Y一般就不用,如果没办法必须用,就调单克隆吧
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地板
发表于 2012-1-4 12:45 |只看该作者
用低糖DMEM 可能会好些 高糖易分化
# t% E$ q# r4 y8 R
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发表于 2012-1-4 15:12 |只看该作者
α-MEM专用于培养干细胞的基础培养基,另外全贴壁法本身就不纯。最好梯度离心
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发表于 2012-1-4 21:02 |只看该作者
本帖最后由 bnm789 于 2012-1-4 21:03 编辑
. Y1 B# B2 @( s$ u) d8 a, e6 l4 `9 A) Q/ J6 C9 h* |+ `7 h3 K! S1 H( V. j# ^
回复 ellapan 的帖子
% U* `% T8 K/ ~; u+ `  e& h2 ]6 L, r% g
细胞传代后脂肪细胞明显减少 目前已经长满了 几乎未见脂肪细胞

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发表于 2012-1-5 01:22 |只看该作者
回复 sanfa 的帖子1 x! @" e" g# W/ o$ M. ]1 {5 w
. F+ [# H& D6 i2 b; w1 x% q# F
貌似干细胞培养都是低糖吧

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发表于 2012-1-5 09:07 |只看该作者
我还是觉得挑单克隆比较好,这样可以再次进行分离,纯化,可以操作多次,直到纯化为止。
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