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楼主: bnm789
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全骨髓培养法提取间充质干细胞成纤维细胞占优,怎么回事? [复制链接]

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发表于 2012-1-11 20:59 |只看该作者
回复 zarecol 的帖子7 Y$ a; t  d8 L  q7 X7 O0 o
" G, l2 o( @' \3 g: [: p
不是成纤维细胞吗?用bFGF 0.5ng/ml怎么样  

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发表于 2012-1-11 23:14 |只看该作者
bnm789 发表于 2012-1-11 20:59
& V* `# c% [2 w, _6 m' g; W回复 zarecol 的帖子
( N6 i$ q& S1 K/ B- B" u
) k" X1 m/ p2 U0 B  G. a, A不是成纤维细胞吗?用bFGF 0.5ng/ml怎么样
& K, ^& g7 R7 r1 Z- \4 h1 Y
大鼠的 没这么麻烦的# l2 u" Y- h( W% H2 K" }
+ `9 I8 o+ _7 j
取;四周龄一只 双侧股胫骨 无血清培养基或PBS反复冲洗
6 U- X0 W, w- w( d% `* R% q; F1 W 莫起泡
: [1 M5 a( j/ h/ Y# Q过滤一下 离或不离心 DF12+10%GibcoFBS 双抗 L-谷
& g" p3 Q8 I* D6 ~4 L. v: K' ]" a培养
' _4 m/ ^. V3 w次日全量PBS洗数次全量换液,此后隔两日一换) Z! |( U! F7 |9 G7 B
80%以上时传代,首次1:2,再传可1:3
; y9 e, ]& K! E: E: H# ^0.25胰酶首次3-4分钟,此后1-2分钟,37度
  q- d& C; P" P& k3 g& A4 N不加EDTA,故亦不必离心$ a# |% K/ {- h9 A- Q  v  p0 l
难以消化者为上帝不喜者& `7 [! b: M6 H5 J
  {0 x- f+ b0 C8 z) j
勿疑。此法可使之传十代,十代之后,年老色衰,已无当年风华
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发表于 2012-2-4 20:28 |只看该作者
大鼠月龄如何,建议使用幼龄或新生大鼠,另外培养液内加因子,不过加什么因子,我当时是实验室老师做好了,我直接用的,现在想不起来了。
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