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IPS冻存过程中的失误,不知道会不会对细胞有影响? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-1 02:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
今天在冻存细胞的时候,冻存液不是逐滴加入的,不知道会不会对细胞有影响?5 W  q( h) u9 |3 ^" `0 T7 N
具体操作过程:先加入0.5ml的重悬液(80%DMEM, 20%FBS),混匀后,再加入0.5ml的冻存液(60%DMEM,20%FBS,20%DMSO),在加入冻存液的时候是直接加进去的,不是逐滴得,刚加入的时候可以看见混合液有油状物质,但立即混匀, 这个过程很短,不知道对细胞是否有影响呢。因为细胞十分珍贵,所以恳请有经验的童鞋们告知是否会影响细胞,而且如果有影响,要如何补偿呢?谢谢啦:P
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沙发
发表于 2012-2-1 08:46 |只看该作者
跟细胞状态有关,细胞状态好的话,问题不大
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藤椅
发表于 2012-2-1 10:04 |只看该作者
回复 sarah19860420 的帖子
  o) s" R1 b6 |3 z' B" j  N3 `; }% T7 }( l' y% |: h/ X7 ~5 y& L" ~* y
不会影响,如果你的IPS一直生长的正常的话。
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板凳
发表于 2012-2-1 22:23 |只看该作者
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回复 sino85196488 的帖子: F4 L; {6 {6 Z" J4 x, g  c+ {, _
7 y4 R& |- X  t
恩, 好,那我就放心啦,嘿嘿,谢谢

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报纸
发表于 2012-2-1 22:24 |只看该作者
回复 dianying 的帖子$ @/ f/ i7 h! y
- @1 Z& P& x% g" h7 B
谢谢,:P

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地板
发表于 2012-2-2 01:05 |只看该作者
如果在冻IPS之前,你的细胞一直生长的正常的话,应该问题不大。
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发表于 2012-2-2 09:56 |只看该作者
建议冻存时提前将培养液与DMSO混合好放置一段时间,应为DMSO加入后会产生放热反应,若立即就加入细胞多少会对细胞有伤害。(DMSO为SIGMA公司生产,其他公司的DMSO会不会有产热现象不清楚)
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发表于 2012-2-2 11:06 |只看该作者
请问你的IPS细胞是自己诱导的吗?  r1 }6 Y& ?/ {: L% v

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金话筒 优秀版主

9
发表于 2012-2-3 14:20 |只看该作者
是啊
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