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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑
6 _5 q& V! `5 S$ o- h1 |$ t
: O2 h5 [. S# f4 }' n2 L7 H每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子6 y. Z- D' z5 ^
' N& S+ H6 }/ f0 E
经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
回复 细胞海洋 的帖子$ u6 Z: y' ^2 e! Z2 d) w

% G) s- q. V  _" C/ i经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
8 `2 s' ~: s# }1 L7 Y/ M, S5 r( r4 `& E. o9 }
放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
" S) w- e' n) ^# K' j' Y6 F2 w1 G1 T
从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i& S% r& K% n9 Q! O7 k) Z5 F2 p
1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L" s  `0 i; Z1 N8 A7 m5 Z& {
2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T
* L' p$ U( @+ o& D7 t3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G
) A1 J$ ~6 K; Y2 }- P, ]我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `: _  V7 O* r6 y& h1 F; J& m3 \
只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?
. ]5 r" n/ O( m  g: @  [/ V剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;9 x6 R9 G) {1 K, N5 D
# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了! W& u% |5 }# f* c' R2 h( Q

; r+ k1 P5 V- l尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16 - Y* w5 d1 A- H0 P
回复 leungyk 的帖子8 d# C# {2 a0 I" r, |

' v* a1 Z) h9 m6 E6 ~: ?) r  }从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...
  U, [  e  |0 n8 D4 A
謝謝!
/ F: l4 q# T- G" b1 D& p6 k其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!
# @  J4 T+ ^" Q* r( o, Y, r
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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