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请教华通氏胶的剥离     [复制链接]

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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
剥胶确实是熟能生巧,练多了自然就好剥了。脐带也是有个体差异的,有胶多胶少,有好分离不好分离,有细胞爬出的时间早晚这些差异。我们把脐带放在保存液中,4度保存5、6天,质量不是很差得脐带还是可以长出细胞的。
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发表于 2012-2-16 13:45 |只看该作者
本帖最后由 lazyworm 于 2012-2-16 13:49 编辑
0 s8 e8 x- M. N; k) O9 Z$ T
! ]8 _3 c/ Z  M' w- |1 t! D0 l5 w每当打开个网页,回复个帖子都慢的喘不过气啊。

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小小研究员

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发表于 2012-2-17 00:12 |只看该作者
回复 lazyworm 的帖子
# y4 h) f9 S  j; o. u' E: G( }- H2 c, }! Z5 w5 a7 f1 P3 E
经常还是偶尔 最近浏览量大 的确服务器有时会卡 还望见谅

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发表于 2012-2-17 09:17 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 细胞海洋 的帖子6 i% g0 n0 T" ?# U2 \5 z8 q
/ g. [% r4 m- q1 [) |7 T5 t
经常,可能是浏览量大的缘故吧,说明我们的队伍越来越强大了哈。

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发表于 2012-2-17 09:52 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
8 g6 g& T- B3 Q1 U5 j* B
$ b* X" [8 ?* S7 _放4度啊,要不然你放室温不是也有助于细菌滋生吗!有缓冲液就行了,最好用培养基缓冲没过脐带组织就可以了,里面加双抗。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2012-2-17 10:16 |只看该作者
回复 leungyk 的帖子
) k+ E# z- k# G% ^
) u- h% G! S2 i从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进行处理。
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发表于 2012-2-17 10:57 |只看该作者
我剥过两次,仅做参考:4 g4 m# S! c% {4 i
9 n, M, s% _& l) f: X" ]1.把脐带剪成小段,便于剥胶;: ]9 W3 i6 N; q3 |1 P. n: f$ L8 }$ X* n( Z! v2 c% z
2.纵向稍剪开外表皮,再用带齿镊子沿剪的方向把外表皮撕开,再进行两动脉和一静脉的剥离,该过程基本全是用镊子操作;! v" B) J3 h* L7 T
( J; x- ?* M% D! C" v' t3.血管分离了后再剥胶,除去血管外,表皮内的基本都是可以用来分离间充质干细胞的胶;, n# {* Y, R( \0 G
; l6 p3 y  o4 Z2 p+ d3 f我们剥的胶是可以撕成条的,而且质地胶白,没有你说的粘粘的,估计是采样太久或没有保存好(具体的采样和保存我也不知道)3 D: n" G# p6 `  U: B8 A/ t5 |+ X% Q
只要把表皮撕开就好,不用剥离外表皮,直接把脐带摊开,再撕胶;6 s+ Q% M" D( |* |5 J  ~- l2 ?" H% P2 D7 H+ H3 j
剥胶很费手劲,而且用力要恰当,撕胶的时候不要把表皮也带了;
: q; k3 U' \( t6 m# E( C  n3 f4 F/ [) ]动脉比较好剥,静脉粗薄不好剥离,多操作几次就熟了% k. V- x7 J4 e

0 [4 f0 R; [1 L, f; q尽量剪成小段就ok了
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发表于 2012-2-20 16:38 |只看该作者
非常感谢大家的帮忙!

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发表于 2012-2-21 09:21 |只看该作者
单个核细胞 发表于 2012-2-17 10:16
8 g& ], I. z) c& S! L回复 leungyk 的帖子/ s. O% Z2 u, B- |

8 M9 g* u+ B$ Q- M- u! D从采集、运输到处理前置于4℃~12℃,不要超过48h,建议36h内,以便留下足够的时间进 ...

9 i( I" |3 P) R- P# [) F" k謝謝!' F/ A0 X* M5 J8 _3 t' E
其實我做過個小小實驗,存放在PBS+雙抗中,室溫下12h也可以,但當然效果不是太理想!
! n2 }8 C+ P% m6 e  L$ }
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发表于 2012-8-11 17:12 |只看该作者
为什么我用酶消化之后得到的细胞数量很少呢?
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