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求助:看了一篇文章,很困惑不解。KSR和FBS的区别,DMEM和CDM的差异~ [复制链接]

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楼主
发表于 2012-2-15 11:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
     在丁胜发表的“Conversion of mouse fibroblasts into cardiomyocytes using a direct reprogramming strategy”一文,对他的诱导步骤很是不解。
4 I/ x; l9 b: m9 q" r  文章中的诱导步骤如下:; z" X& d* |, r1 l
病毒转染后,前6d培养基是15%FBS+5%KSR;7-9d,改换1%FBS+14%KSR,在这前9d中一直添加JAK抑制剂;之后改换CDM(chemically defined media(N2/B27))培养,并添加BMP4,第11天便出跳动心肌样克隆。这是直接将成纤维细胞诱导为心肌细胞的初略步骤。
4 h1 ?% y: ^  u9 [3 o. o, t我觉得很不解的是,1.FBS和KSR区别应该不是很大啊,为什么作者要如此设计呢?如果只用FBS不可以么?2.为什么之后又要更换CDM培养基呢?对诱导过程是必需呢还是说是可以提高效率呢?1 r  a2 n4 _: W
    求大家的解答~不胜感谢
5 J$ c& D1 l3 G5 R( d+ s- Z- R# V4 L& b+ x" V& |) K
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沙发
发表于 2012-2-16 14:35 |只看该作者
关注学习下,我也不解,敬候佳音!

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藤椅
发表于 2012-2-16 15:09 |只看该作者
FBS 是胎牛血清 成分不确定 KSR是血清类似物 人工合成的 成分确定
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发表于 2012-2-17 17:35 |只看该作者
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DMEM英文全拼:dulbecco's modified eagle medium,是细胞常规培养用培养基;CDM是加入特定化学因子的DMEM培养基(在google上查到的,酶看全文,不知道是不是这个意思),其中B27和N2就是特定的诱导因子。丁香园上有讨论:http://www.dxy.cn/bbs/thread/4477690#4477690
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发表于 2012-2-17 17:36 |只看该作者
DMEM英文全拼:dulbecco's modified eagle medium,是细胞常规培养用培养基;CDM是加入特定化学因子的DMEM培养基(在google上查到的,酶看全文,不知道是不是这个意思),其中B27和N2就是特定的诱导因子。丁香园上有讨论:http://www.dxy.cn/bbs/thread/4477690#4477690

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发表于 2012-2-17 17:39 |只看该作者
总感觉Ding Sheng的文章极其不易于重复...
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发表于 2012-2-22 11:34 |只看该作者
FBS成分是不确定的,而且每批的FBS各因子的含量是不同的,这样的话就影响实验的重复性,选用成分确定的KSR可以控制细胞的生长条件,减少未知因素的影响。前6d培养基是15%FBS+5%KSR;7-9d换1%FBS+14%KSR,之后换CDM,可能是让细胞逐渐适应KSR培养的生长环境。
2 |' i+ u3 F! L" AN2/B27培养是是用来诱导神经细胞分化的,不解的是有很些文献会用N2/B27培养基诱导心肌细胞分化。
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