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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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11楼
发表于 2012-4-20 19:07 |只看该作者
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ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
" I. h) E" `3 L. o哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

) _+ }& ?- }, _7 U1 f- e确实要知道也不用实时定量这么麻烦,太敏感了还容易放大误差。: X0 A! N+ d; ]; }
4 w3 c- j2 a' }9 b/ X
如果有现成的混合物,买回来,跑块胶,大概就知道了。
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12楼
发表于 2012-4-21 00:52 |只看该作者
sj03572001 发表于 2012-3-31 11:32
7 D; J2 t1 B* `: |VSVG作为膜蛋白,表达量过高对细胞毒性,回造成细胞死亡,如果按1:1:1的比例应该不是最佳的,nature protoc ...

% ?) u. ^1 u9 M9 |这篇文章的质粒用量好大啊。

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13楼
发表于 2012-4-21 00:53 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20 ( {. ~( ~( l, f! n7 C
哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例
! _" A' u3 s9 k4 @  X4 ?. Z% o) P
要知道也不用实时定量的,太敏感又缺乏内参,误差的放大无可估计的。# T5 _, r7 w8 m. f4 f

) P( m/ W2 A& I* f* E- H/ _: ]& c直接跑个胶就大概知道了,关键是没有这个混合物。
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金话筒 优秀会员

14楼
发表于 2012-4-24 11:43 |只看该作者
回复 hetven 的帖子
0 |# N9 E' _, }. E. g8 E* g
% a$ g3 y! j4 ?; D, V买一套罢,然后破解了就拿出去卖

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15楼
发表于 2012-4-24 17:42 |只看该作者
回复 hetven 的帖子6 u1 Q4 ?" w' [$ y* _* v- m$ M0 h- `) d9 _
/ }1 x3 b% d7 k8 Z
不大了,他那时12X15dish的量 ,我们10X10 用的是 100 100 20 50
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16楼
发表于 2012-5-31 23:26 |只看该作者
O(∩_∩)O谢谢

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17楼
发表于 2012-6-1 14:18 |只看该作者
按比例大约为1:1:1试试,就是说目的基因跟包装载体按5:4试试(5:5:4),你可以试试,膜蛋白毒性很大,多了不好,所以适当降低其比例是可以的
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18楼
发表于 2012-6-29 10:19 |只看该作者
有谁做个比例优化啊

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小小研究员

19楼
发表于 2012-7-1 15:25 |只看该作者
回复 biosenselot 的帖子
1 ]7 Q, l- l. F# s  v9 i( q6 J. ?1 r* u' O* ^
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20楼
发表于 2012-7-9 10:43 |只看该作者
正准备用这套病毒!!好东西!
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