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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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发表于 2012-4-20 19:07 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
* C5 H# W  k. c( `哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例
% W# m, ^- g+ A' ]" {7 v1 x
确实要知道也不用实时定量这么麻烦,太敏感了还容易放大误差。
' n' ]3 F. H' p3 M* T* F, a! z- w; a
  X$ `6 G" r: y* h如果有现成的混合物,买回来,跑块胶,大概就知道了。
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发表于 2012-4-21 00:52 |只看该作者
sj03572001 发表于 2012-3-31 11:32
% {$ k2 e2 o0 R# vVSVG作为膜蛋白,表达量过高对细胞毒性,回造成细胞死亡,如果按1:1:1的比例应该不是最佳的,nature protoc ...

1 M  ?- Y. f) H0 D1 s5 m3 @( z这篇文章的质粒用量好大啊。

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发表于 2012-4-21 00:53 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
0 [+ ~- w4 M0 `$ \7 `: S哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

0 j  B$ v, |& Z, O5 w8 @+ B要知道也不用实时定量的,太敏感又缺乏内参,误差的放大无可估计的。  T/ Z2 i2 U: c1 i3 U/ P

& a7 a, d1 ~1 W% M' P直接跑个胶就大概知道了,关键是没有这个混合物。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-4-24 11:43 |只看该作者
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回复 hetven 的帖子: k) E. y3 D) x2 B# O

+ m8 M9 [% h) Q% T买一套罢,然后破解了就拿出去卖

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发表于 2012-4-24 17:42 |只看该作者
回复 hetven 的帖子
: c; k3 @5 E! L: u/ }3 y! r
% Y3 _! [( j2 R% n不大了,他那时12X15dish的量 ,我们10X10 用的是 100 100 20 50
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发表于 2012-5-31 23:26 |只看该作者
O(∩_∩)O谢谢

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优秀会员 金话筒

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发表于 2012-6-1 14:18 |只看该作者
按比例大约为1:1:1试试,就是说目的基因跟包装载体按5:4试试(5:5:4),你可以试试,膜蛋白毒性很大,多了不好,所以适当降低其比例是可以的
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发表于 2012-6-29 10:19 |只看该作者
有谁做个比例优化啊

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小小研究员

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发表于 2012-7-1 15:25 |只看该作者
回复 biosenselot 的帖子
+ u" o( p; H. X! v1 {6 w, X( a' W
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发表于 2012-7-9 10:43 |只看该作者
正准备用这套病毒!!好东西!
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