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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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31楼
发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
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这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

32楼
发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子
# `$ T9 y7 M1 i- Y) _6 w' F- s/ Y) u7 W- w* {
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样6 v; l+ ~* I5 A: |
! p/ N+ r& Y! y4 U
否则他会看不到
# x" W! i+ |% J

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小小研究员

33楼
发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子# _+ s9 j: G# b, x

4 s8 b. B% J5 T) t  }" `" a/ B看31楼

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34楼
发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。
. e0 H7 f6 }& \1 A但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。5 j, a# y$ E" w8 @4 |+ H
我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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35楼
发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子' G6 g1 C! D( ^( L: Z: w( V' Y
. H1 _! f) o) I& r1 W9 I* \
一点问题,
6 l" w8 U& P/ h8 B% A: ]06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95, Q: o; P3 n* _$ M- H

- y- ^* n" P* j% n4 s8 L如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:16
" [* @2 e$ f8 W也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:3. V$ ]2 Z& u; ^# o/ C
3 T2 X" F# Q0 I5 J6 K
我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。6 x0 [& t# N$ y' m: ~6 P" D  Q

# D$ U6 @' ]4 x* U/ u; x还请高手们解惑,=)拜谢了~
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36楼
发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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37楼
发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子. S/ c2 _  k8 f  @# m: {+ K- w& e
: V4 b5 [+ F; K1 g. F4 }
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38楼
发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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39楼
发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

40楼
发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子
3 ]+ S$ O1 f1 n" N' F, v# T% X# P9 {+ j/ y! ?* O: `
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