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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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包包
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发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子' o7 `) F4 H& Y) g4 J

  |1 b) z4 z8 W! j# o( [你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样: p/ k* C$ ~, u) u$ w4 M4 B

2 b: `) f* _( a% F' O否则他会看不到
) J! ]" i6 V7 F+ Q/ j, g- Q) V

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小小研究员

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发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子8 ?; }, c; v2 B% Q
/ \3 R% {: Y+ V) H* K
看31楼

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发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
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这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。( r8 q/ M: v4 [7 D$ o
但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。
% P0 z4 ]) e4 y9 j2 ^4 M- i  C* L) o& w我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子* S4 {! s/ k' r# Z* t5 d) t
8 l5 ^! m2 t9 y3 t
一点问题,8 {* g2 _. C/ Z* X5 v
06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95; _; U+ ?& c# T8 {: k
! q; R$ x8 R5 s3 r$ I0 U2 X6 T( c$ G5 L
如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:16# ?/ h, v. Y, y
也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:3
5 V2 A* D2 w- g0 @2 z. i% c  N9 a: w% R; L8 v, @
我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。
1 g0 q3 `- K  ?& v2 `# r  [5 X5 S( v6 z
还请高手们解惑,=)拜谢了~
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发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子- D8 @2 W7 L1 Y5 l5 s9 G1 N

% V; Z/ N2 l$ s" @- q2 w$ O建议你发新帖提问

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发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

40
发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子
6 w7 }# f4 w/ e) W' _4 @, c, q
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