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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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31楼
发表于 2013-7-23 22:37 |只看该作者
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这几个比例每个公司都有自己的体系,体系一般固定不变,但这几种质粒在大提时想得到高质量的质粒有些困难,Mage、MN的试剂盒都试过,也不是很理想。每一批次的质粒质量直接影响每一批次慢病毒包装试剂盒的质量,必要的时候根据定量PCR的数据效果,会尝试稍微改变体系,这是一件很费时费力的事。
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小小研究员

32楼
发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 Dancmacabre 的帖子
) g; x" b$ [) m* Q
  d9 A2 w" D/ g8 ~8 v你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
) W; Q2 b( j1 |7 ^* i% @/ @3 Y8 W' I3 U7 K$ K7 X
否则他会看不到
+ M# U" z1 n% i4 U, l3 ^

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小小研究员

33楼
发表于 2013-7-24 10:09 |只看该作者
回复 翱翔的鱼 的帖子% ~0 c" p4 U/ H& I) {
. V& \+ f5 ~9 _# C* U2 `
看31楼

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34楼
发表于 2013-11-7 13:00 |只看该作者
这套系统我也在用,在包pCDH miRNA时,效果很不错,浓缩后滴度可达8次方。0 u* |( Y5 Z$ ^& m3 h
但是包装pLVX时效果则很差,不知道是不是兼容性不够好。3 F) H' W) w5 A& o3 h: G& R/ I
我觉得pLP2的量不能太少吧?因为Rev不仅要带入核,还要允许pLP1上gagpol表达,个人觉得5:6:5:4是不是比较合适~
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35楼
发表于 2013-11-19 16:31 |只看该作者
回复 sj03572001 的帖子0 r" l! z$ k) _6 o/ b7 y; N- F3 R: s( r
. p' `: t- M2 X8 x: j
一点问题,9 ^. Z9 \- f3 X* u
06NP里的质粒质量比例 transfer:pMDL(gagpol):pRev(rev):pVSVG= 270:176:68:95' I( o5 d) U  i

) }0 a4 S* d% E2 ?# _如果考虑各质粒的大小改为mol比的话,我算了一下大概是=34:20:16:16( v  _& M/ V6 n" ^5 y: q5 B/ ~* Q
也就是说,表达质粒与包装质粒的mol比例为=34:52 约等于 2:3  w8 U& Y7 e3 k
2 o+ N( y$ R& i- P# S
我一直困惑所谓的比例是应该按质量还是mol计算。7 i3 g3 Q* f& Q+ k+ u" F$ w( N
. p! j% [% Z. l, ^! M% q
还请高手们解惑,=)拜谢了~
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36楼
发表于 2013-11-19 20:43 |只看该作者
还有一套包装系统PSPAX2+PMP2G跟这个包装质粒系统有什么差异
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37楼
发表于 2013-11-20 08:07 |只看该作者
回复 shermin 的帖子
2 l! l- E. ~! A( Q% d" U+ P. M1 i# g4 x
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38楼
发表于 2013-12-7 21:21 |只看该作者
1:1:1:1出来的效果不是很好啊
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39楼
发表于 2013-12-26 11:28 |只看该作者
我也想知道哪种比例效果最佳,求高手指教

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小小研究员

40楼
发表于 2013-12-30 01:19 |只看该作者
回复 zje6265610 的帖子
! I' Y, L6 V) f" g- G& x4 ?2 y' a8 Q8 x
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