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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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发表于 2012-4-20 19:07 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
( g! V' C* N4 G$ [& v哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

' T3 m2 Y: K! ]* Q7 N1 \确实要知道也不用实时定量这么麻烦,太敏感了还容易放大误差。
4 S9 X$ W  g- t* l) k5 l5 f$ c) N9 `" }- S6 D( X$ Z
如果有现成的混合物,买回来,跑块胶,大概就知道了。
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发表于 2012-4-21 00:52 |只看该作者
sj03572001 发表于 2012-3-31 11:32
( `, y4 ?7 n* g, G7 B. \VSVG作为膜蛋白,表达量过高对细胞毒性,回造成细胞死亡,如果按1:1:1的比例应该不是最佳的,nature protoc ...
3 p3 |$ C7 K7 C9 A
这篇文章的质粒用量好大啊。

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发表于 2012-4-21 00:53 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20 - E5 G7 Q) }; L% r% f
哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

5 \# K4 i/ y1 x  N0 y6 _. \" O, n% c要知道也不用实时定量的,太敏感又缺乏内参,误差的放大无可估计的。
# q4 P$ m) u! @" ^  ]9 z: c+ A( t2 r* F, k, D! d0 Y/ D: R
直接跑个胶就大概知道了,关键是没有这个混合物。
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-4-24 11:43 |只看该作者
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3 i' B+ t- `/ f; e3 T% _; `4 l  q. x4 [
买一套罢,然后破解了就拿出去卖

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发表于 2012-4-24 17:42 |只看该作者
回复 hetven 的帖子: R) g  ?& ]4 r8 g* T( C! k9 B! g

/ ]1 l% T" a2 V5 s! u不大了,他那时12X15dish的量 ,我们10X10 用的是 100 100 20 50
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发表于 2012-5-31 23:26 |只看该作者
O(∩_∩)O谢谢

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发表于 2012-6-1 14:18 |只看该作者
按比例大约为1:1:1试试,就是说目的基因跟包装载体按5:4试试(5:5:4),你可以试试,膜蛋白毒性很大,多了不好,所以适当降低其比例是可以的
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发表于 2012-6-29 10:19 |只看该作者
有谁做个比例优化啊

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小小研究员

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发表于 2012-7-1 15:25 |只看该作者
回复 biosenselot 的帖子
/ x% ?" D7 i! V9 f; C1 B2 |# `2 H: n" [5 K0 D) U0 _& m5 ?
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发表于 2012-7-9 10:43 |只看该作者
正准备用这套病毒!!好东西!
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