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楼主: 刘森泉
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[请教] pLP1、pLP2、pLP/VSVG包装慢病毒     [复制链接]

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11楼
发表于 2012-4-20 19:07 |只看该作者
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ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20
  W0 K2 F$ l9 C' k哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

$ A% N& m) F% b) L! |1 i" u确实要知道也不用实时定量这么麻烦,太敏感了还容易放大误差。+ G4 s- G4 t' l6 C7 D8 k

6 a! K- r/ K7 h3 f6 B如果有现成的混合物,买回来,跑块胶,大概就知道了。
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12楼
发表于 2012-4-21 00:52 |只看该作者
sj03572001 发表于 2012-3-31 11:32
2 g! o9 ?0 o3 ]# Y4 UVSVG作为膜蛋白,表达量过高对细胞毒性,回造成细胞死亡,如果按1:1:1的比例应该不是最佳的,nature protoc ...
5 O( C8 M- ~2 W9 n
这篇文章的质粒用量好大啊。

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13楼
发表于 2012-4-21 00:53 |只看该作者
ghfvcat 发表于 2012-3-28 10:20 / w0 ?9 z% \* M$ ]/ h
哈哈,实在不确定比例的话,从英骏买个现成的混合物,做一个实时定量看看质粒的比例

0 T2 j4 y7 }& b! ]7 k要知道也不用实时定量的,太敏感又缺乏内参,误差的放大无可估计的。9 `. m$ F+ e6 \( |; @5 S0 e" M
! g; V2 c, J& c7 Q- i$ W
直接跑个胶就大概知道了,关键是没有这个混合物。
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金话筒 优秀会员

14楼
发表于 2012-4-24 11:43 |只看该作者
回复 hetven 的帖子0 I/ s6 O' o; z7 v& b
" H1 M1 t) J! z& O; b* ~
买一套罢,然后破解了就拿出去卖

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15楼
发表于 2012-4-24 17:42 |只看该作者
回复 hetven 的帖子
& T8 l% W7 s5 d3 s1 I3 b. X  I* A
不大了,他那时12X15dish的量 ,我们10X10 用的是 100 100 20 50
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16楼
发表于 2012-5-31 23:26 |只看该作者
O(∩_∩)O谢谢

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优秀会员 金话筒

17楼
发表于 2012-6-1 14:18 |只看该作者
按比例大约为1:1:1试试,就是说目的基因跟包装载体按5:4试试(5:5:4),你可以试试,膜蛋白毒性很大,多了不好,所以适当降低其比例是可以的
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18楼
发表于 2012-6-29 10:19 |只看该作者
有谁做个比例优化啊

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小小研究员

19楼
发表于 2012-7-1 15:25 |只看该作者
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20楼
发表于 2012-7-9 10:43 |只看该作者
正准备用这套病毒!!好东西!
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