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第一次培养胚胎神经干细胞,几个问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-1 11:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
1.我们实验室只有bFGF,没有EGF,培养基里面只添加B FGF可以吗?好像EGF对于神经干细胞分化为神经元不是太重要吧?
5 ~# q9 F; r4 `5 O4 u7 z2.我准备取E14.5的胎鼠大脑,是不是仅需要剥离脑膜和血管,然后剪碎整个大脑?
( s3 w5 E8 X0 s" @4 Q$ h3.悬浮培养是不是只需要剪碎,用200目网过滤,然后培养就OK?
2 k% f0 d* m0 l5 @( I, T* G5 n1 c8 ]2 T' D% K
谢谢
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沙发
发表于 2012-3-1 12:58 |只看该作者
1,bFGF在神经干细胞增殖的早期阶段发挥促有丝分裂的作用,使神经干细胞获得对另一作用更强的促有丝分裂因子EGF的反应性,而EGF在神经干细胞增殖后期发挥作用(Ciccolini F.Identification of two distinct types of multipotent neural precursors that appear sequentially during CNS development.Mol Cell Neurosci,2001,17(5):895—907)。单独用bFGF也可以,但效果不如两者都用。5 M# C3 v! c$ h* B( ~! P
2,我取小鼠全脑做神经球,没有去除脑膜,剪碎后消化。好像过滤也可以。哈哈
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