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酶消化法培养脐带干细胞的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-3 10:27 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
昨天用酶消化法做了分离,去除脐带动静脉皇后采用胶原酶2和胰酶分别消化(先用胶原酶消化,取四个离心管并不同时间段,1.2.3.4小时,再用胰酶将上述四管分别消化30分钟),今日观察有些细胞已贴壁,呈圆形,但未看到梭形的细胞........请教各位老师及高手,贴壁后的圆形细胞可能是哪一类?如果是干细胞的话,贴壁后多久才会变为梭形?谢谢大家
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沙发
发表于 2012-3-6 16:39 |只看该作者
干细胞没有很固定的形状。也许圆形的也是哟
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藤椅
发表于 2012-3-7 08:59 |只看该作者
回复 初学者 的帖子% O# `3 s' g! W1 f$ P# {' b7 |, v

' q3 b+ H- `, v& |; l5 G我的12天长出,但是换液后就死掉了不知道为什么

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板凳
发表于 2012-3-7 09:27 |只看该作者
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文献报道贴壁时间大多为三天内,也有报道说几个小时就可以贴壁,并且细胞伸展成梭形或不规则形,各家说法不一,也不知道到底怎么回事,还望高手指点啊
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报纸
发表于 2012-3-8 10:35 |只看该作者
一般三天就可以成梭形了.酶消化法对细胞伤害大,这个度不容易掌握。% U1 r9 r  n6 z5 c) N
试试组织块贴壁法?
7 r& \  {4 }9 _& l% n还有,培养基很重要哦
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地板
发表于 2012-3-8 12:08 |只看该作者
有文献说48h就贴壁,但是有些会晚点贴壁,可以多养几天再换液。并且注意当看到干细胞贴壁,并相互交联,集中生长时才适宜全量换液,不然单个干细胞容易死亡。1 U* O/ R+ m/ }1 u, s$ N- Y
一般来说,间充干贴壁后,胞质变薄,就会呈现梭状。
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