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楼主: yuhaoze
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关于饲养层细胞制作     [复制链接]

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发表于 2012-3-5 20:53 |只看该作者
回复 jessewill 的帖子/ S5 M0 b3 q1 L9 C  u2 h' i& r: ~2 Y1 q
5 E  S5 l# a9 i* u0 R5 l4 l$ F2 J
有道理。原理,文献,有木有

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发表于 2012-3-6 08:56 |只看该作者
个人感觉13.5天的胎鼠发育大小比较适合做MEF:太小的话肉眼不易分辨;太大的话胚胎发育的一些血管甚至内脏都会影响MEF的贴壁,分离不好还可能混杂其他细胞,影响后期实验。5 r) R, c# W, s
老鼠在做合笼前可以打激素做超排,这样能同时得到更多的胚胎。2 y" k  h% K$ ?7 G  {8 B9 o3 Z
另外,感觉戴手套操作,不仅能预防污染,最重要的是防护自己,毕竟是动物操作。
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发表于 2012-3-6 09:16 |只看该作者
上个礼拜刚制备完一批MEF细胞。买的现成13.5天的CF-1孕鼠(350RMB/只),一只小鼠有12-19个胚胎不等,楼主的胚胎照片确实有点大。我当时是下午做的,约5-6个胚胎装一个150的培养瓶,第二天上午就非常满了,建议可以3个左右装一个150。制备MEF,避免污染是非常重要的,前期的培养基可以加入双抗。
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发表于 2012-3-6 09:44 |只看该作者
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回复 laurel101 的帖子
* |8 P! J5 V3 k# p6 E7 A0 @5 w) y" F6 b! I9 ?1 K' D
怎么联系买到的CF-1孕鼠啊? 非常感谢啊

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发表于 2012-3-6 09:48 |只看该作者
回复 xiangchou812 的帖子
8 |0 K0 j( u% f" I) z" t
5 v( W" Q5 u4 b- [2 N戴手套操作我觉得这是一个无可争辩的事实,不需要争论!既保护自己,又避免样品污染。不能为了省一点小钱而影响实验。
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发表于 2012-3-6 12:12 |只看该作者
回复 573639471 的帖子
2 b6 l0 b( x! w) p, ]: X$ o! S
5 O  N7 ?, ~/ b: F% n9 ~' K上海斯莱克就有卖的

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发表于 2012-3-7 08:09 |只看该作者
回复 hanwei0610 的帖子3 G( h2 U) H$ C+ H, S( v

8 I$ c5 _# N, y% s谢谢!

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发表于 2012-3-7 08:10 |只看该作者
回复 laurel101 的帖子
( l! k6 o6 h+ ~: d2 U; u2 w9 R3 y9 H# p
谢谢!

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发表于 2012-3-7 08:10 |只看该作者
回复 南宫燚岚 的帖子
8 H* R  D5 L" h- i# E7 n3 u7 i
" b2 J$ J9 V# B6 P( @9 {! X  P. v谢谢! 还是保护一下比较好!

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发表于 2012-3-7 08:13 |只看该作者
回复 laurel101 的帖子
0 g4 U& ~4 ]1 r$ L
# z7 y  E! X% y# d: \0 P想问一下,您是用什么方法将小鼠剪碎的,容器是啥, 我用眼科剪子和青霉素小瓶子,不过论坛里有人批评说这样不太好
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