关于饲养层细胞制作

yuhaoze

回复 jessewill 的帖子$ W5 |. J9 ]0 w/ S: B4 T
, Q5 P1 _* ?6 D& x# R. `
有道理。原理，文献，有木有

hanwei0610

个人感觉13.5天的胎鼠发育大小比较适合做MEF：太小的话肉眼不易分辨；太大的话胚胎发育的一些血管甚至内脏都会影响MEF的贴壁，分离不好还可能混杂其他细胞，影响后期实验。5 X( w& X: B# b6 {" v6 r9 n1 n& z
老鼠在做合笼前可以打激素做超排，这样能同时得到更多的胚胎。' P1 W( ], i; w$ Q! @! n
另外，感觉戴手套操作，不仅能预防污染，最重要的是防护自己，毕竟是动物操作。

laurel101

上个礼拜刚制备完一批MEF细胞。买的现成13.5天的CF-1孕鼠（350RMB/只），一只小鼠有12-19个胚胎不等，楼主的胚胎照片确实有点大。我当时是下午做的，约5-6个胚胎装一个150的培养瓶，第二天上午就非常满了，建议可以3个左右装一个150。制备MEF，避免污染是非常重要的，前期的培养基可以加入双抗。

573639471

回复 laurel101 的帖子
- W# j' P& l+ K( Q5 ~: i- U7 L4 d
( f& p; N$ x0 O8 M2 D! B; _怎么联系买到的CF-1孕鼠啊？ 非常感谢啊

南宫燚岚

回复 xiangchou812 的帖子9 n7 f5 t- K$ c' A/ n5 B
' Y6 Y5 f+ U5 z/ t0 t
戴手套操作我觉得这是一个无可争辩的事实，不需要争论！既保护自己，又避免样品污染。不能为了省一点小钱而影响实验。

laurel101

回复 573639471 的帖子
0 J% z' D4 c& q$ a9 T, l
: g* a  Y* w& J& Y) X上海斯莱克就有卖的

yuhaoze

回复 hanwei0610 的帖子# U+ Z2 }/ I+ o- P

- M$ ]+ j6 ~1 ]% |1 o谢谢！

yuhaoze

回复 laurel101 的帖子9 E, z0 t, F$ S9 f- z/ w5 ^+ l3 q
& X2 }4 w. D, u) h: o
谢谢！

yuhaoze

回复 南宫燚岚 的帖子
$ d8 f; Q4 q; p# y( a6 w6 C3 G% t3 B! j
谢谢！ 还是保护一下比较好！

yuhaoze

回复 laurel101 的帖子
  P) O! Z( j' D( `
9 X* D1 q, X7 ?想问一下，您是用什么方法将小鼠剪碎的，容器是啥， 我用眼科剪子和青霉素小瓶子，不过论坛里有人批评说这样不太好