胰蛋白酶EDTA对我的EPC居然不起作用？！

lcxlorna

完全同意上面xbs530515 的说法，先用消化液润洗细胞一次，弃掉。再加入新的1ml液体进行消化，放在培养箱，每隔几分钟注意观察一下消化进程。或者把消化液预热一下，同样做法，会加快消化时间。

henryjia

谢了，明天试试

杨磊1

以前也遇到过这个问题，先从酶的浓度考虑，然后在考虑培养瓶。如果两者皆无改变，应考虑此细胞是否你需要的细胞。这是我师傅交我的。

542177563

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. m6 U$ k/ D5 b8 m3 T* I+ N
; Q8 U  ]( h0 b0 q你好，请问你是什么来源的EPC？

henryjia

脐带血4 w( C4 Y! p* M* O0 m3 k- r1 r- g, [

穿越地平线

建议0.25%的胰酶-EDTA

穿越地平线

最多3分钟

刘艳85

先用生理盐水将细胞洗涤一两次去除残余的培养基，然后再用胰酶消化

wind789

henryjia 发表于 2012-3-7 21:17
4 }: ^2 X" h4 \: w似乎有很多圆形成骨细胞，怎么去除呢？% |7 P5 ]- U+ `

- u0 x6 I; g3 O; Z" i说明一下，我是希望可以从脐带血中提取MSC

1 c7 t2 {! X* i$ u7 `# r
这种细胞不好消化，温箱半个小时都不行。直接细胞刮刀吧。

almasun97184

你那个真的是内皮细胞么？内皮细胞是很好消化的细胞。我养的脐血EPC都是必须把胰酶EDTA稀释5倍以上才行的，不然消化后细胞状态会渐渐不好。
. B7 x8 Q2 ]/ k通常先PBS洗一次，用预热了的0.01%的胰酶EDTA，在培养箱里放1分钟，拿出来观察细胞就基本都变圆了。
2 l8 {7 k3 b) f6 \& s* d8 N0 m建议你原位用免疫组化检测一下。