请教！我用无血清培养基养的胃癌原代细胞，为什么会出现这种小颗粒？

暮色英雄

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冲洗？我是取一个6cm的培养皿，在里面加入PBS，然后将肿瘤组织放在里面浸泡，然后再换一个装有PBS的培养皿浸泡组织，这样是不是不行啊？

holywater

试试如果肿瘤块没有那么小，短暂浸一下医用酒精

laurel101

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: {: H* a5 b& A# _" M) J4 UPBS里最好也加P/S双抗。

暮色英雄

回复 holywater 的帖子* O: ~9 Y( F0 Z9 P! g/ b

# \8 |- y; |0 S, a& O是胶质瘤，脑袋里面取出来的，很脆弱

evial

看了上面的回答我真是要吐血了！是不是没有上过医学院？0 F$ C# ^" _; F  ~6 E
人体组织怎么可以用酒精泡！！！你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉？酒精会损伤组织的还怎么样细胞？而且只是一般消毒起不到灭菌作用，别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药！
" h. d0 W) K9 p  P; r这样浸泡根本不足以去除细菌，你想一碗面上漂的油，把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么？还是有的啦，也就是说人胃里粘膜上有很多细菌，这在整个消化道都是生理性的正常的，但是对培养细胞不利，细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗！别不舍得PBS，提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟，基本可以将细菌概率降到最低。

evial

看了上面的回答我真是要吐血了！是不是没有上过医学院？
  m" D4 z$ j; y* c+ i+ p3 T3 l人体组织怎么可以用酒精泡！！！你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉？酒精会损伤组织的还怎么样细胞？而且只是一般消毒起不到灭菌作用，别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药！
! @- T; _1 W! v' e. n% x这样浸泡根本不足以去除细菌，你想一碗面上漂的油，把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么？还是有的啦，也就是说人胃里粘膜上有很多细菌，这在整个消化道都是生理性的正常的，但是对培养细胞不利，细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗！别不舍得PBS，提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟，基本可以将细菌概率降到最低。

evial

你不是说胃癌么？怎么又变成胶质瘤了？脑子里出来的绝对无菌，把血冲洗掉就可以了。脑子里出来还有细菌病人要得脑膜炎了

holywater

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* y2 ~' m, `, h. S1 ]+ `回复 evial 的帖子
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看了上面的回答我才要吐血呢，你不看题目，就莫名批评人，怎么能做好实验" V6 q! t8 p7 Z  N9 E# w

+ L& O8 {) j5 z+ s/ Y楼主是肿瘤细胞原代培养，不是要给人手术缝合！题都没审好就乱叫。# z2 C' S$ ^* z- b/ p" f6 I

5 d2 k' l# B3 w- u( [组织培养用些表面消毒剂很正常。PBS冲洗，你洗多少次也是降低污染概率而不是除掉污染
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你有没有学过组织培养啊，酒精是表面消毒剂，如果肿瘤块不是那么小，酒精浸泡个半分钟一点事情都没有。我原代培养时候经常泡酒精消毒老鼠( d; s: l) F* c; o3 K9 N& W: H

& ]& Q5 c: X" d, A  Z' D! T, h7 w植物组织培养还用氯化汞消毒呢，你怎么不批评一下？
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holywater

为什么我到哪儿都遇到这种人，题目都不看好就乱反对别人的？还你有没有做过手术，我没做过手术但是我做过200次的神经元原代培养！
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% x8 J- t, w  l: |1 u! L4 O论手术，我可能只会用菜刀切猪肉，但是论原代培养，那你就像婴儿画画。

evial

脑组织是无菌的，只要注意无菌操作应该是不会污染的，而胃黏膜是有菌的。小鼠可以酒精浸泡一下再取骨髓。你试过在培养基里面加点酒精或者其他消毒液看看细胞会不会死？& Z. w! L+ G8 _+ `7 f  z
这和审题有关么？你写的内容已经给大家看到了么，你写了标题没有啊，大家都没看到你有标题么！; T5 S6 F+ F. [( {% r
那本老外写的protocal我们一起看看吧，那里写着用来培养的组织块可以用酒精或其他消毒液泡？% x3 J* g( ?, D4 P; r; H, d
我是外科的，酒精在消毒剂中不是最强的。培养房的表面消毒我们用次氯酸钠消毒片做的水擦洗，连肝炎病毒都可以杀死，你要不试试用来泡组织？' L# |8 @& U; {
干细胞之家是交流学术的场地，不是小朋友吵架的。做科研和做人都要踏踏实实！