请教！我用无血清培养基养的胃癌原代细胞，为什么会出现这种小颗粒？

暮色英雄

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2 h. R; j2 y2 w3 N) D冲洗？我是取一个6cm的培养皿，在里面加入PBS，然后将肿瘤组织放在里面浸泡，然后再换一个装有PBS的培养皿浸泡组织，这样是不是不行啊？

holywater

试试如果肿瘤块没有那么小，短暂浸一下医用酒精

laurel101

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9 H& W' V# R- `. j0 M- r
! R7 N' g8 W( Y3 h" y6 o3 ~, RPBS里最好也加P/S双抗。

暮色英雄

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0 K$ V, m1 j) A/ i; b6 @: [& z- q* O+ j
是胶质瘤，脑袋里面取出来的，很脆弱

evial

看了上面的回答我真是要吐血了！是不是没有上过医学院？
- d7 H  ]! K/ W- w7 O2 H人体组织怎么可以用酒精泡！！！你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉？酒精会损伤组织的还怎么样细胞？而且只是一般消毒起不到灭菌作用，别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药！
! C7 h; b9 q& X7 x4 x' H这样浸泡根本不足以去除细菌，你想一碗面上漂的油，把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么？还是有的啦，也就是说人胃里粘膜上有很多细菌，这在整个消化道都是生理性的正常的，但是对培养细胞不利，细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗！别不舍得PBS，提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟，基本可以将细菌概率降到最低。

evial

看了上面的回答我真是要吐血了！是不是没有上过医学院？
, i! m0 g6 G4 T) m3 }! J人体组织怎么可以用酒精泡！！！你的伤口用酒精擦擦看看什么感觉？酒精会损伤组织的还怎么样细胞？而且只是一般消毒起不到灭菌作用，别以为实验使用的酒精就是灵丹妙药！6 _5 V2 }3 |5 S: m
这样浸泡根本不足以去除细菌，你想一碗面上漂的油，把面捞出来放在另一个汤碗里上面还有漂油么？还是有的啦，也就是说人胃里粘膜上有很多细菌，这在整个消化道都是生理性的正常的，但是对培养细胞不利，细菌也不会因为泡PBS就死了。唯一方法就是用流动水冲洗！别不舍得PBS，提着组织用针筒吸了PBS冲5分钟，基本可以将细菌概率降到最低。

evial

你不是说胃癌么？怎么又变成胶质瘤了？脑子里出来的绝对无菌，把血冲洗掉就可以了。脑子里出来还有细菌病人要得脑膜炎了

holywater

2 U$ i4 H/ w1 ~, H( U4 s: m, u& x
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  n: A" n8 t# S( C
. h5 F4 d3 u1 z0 F0 A0 w; k9 o' [  d
$ A, B% E& y4 t  m" T+ e看了上面的回答我才要吐血呢，你不看题目，就莫名批评人，怎么能做好实验3 b) w7 t: l' }+ V6 `+ l4 i
7 m; k. e$ h. f, q9 Y8 b
楼主是肿瘤细胞原代培养，不是要给人手术缝合！题都没审好就乱叫。
5 z; _  {' z/ I8 O1 `
7 M% V1 t, w" C组织培养用些表面消毒剂很正常。PBS冲洗，你洗多少次也是降低污染概率而不是除掉污染
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# n# u) Y) o1 Q5 A4 o: J+ b& i0 {
你有没有学过组织培养啊，酒精是表面消毒剂，如果肿瘤块不是那么小，酒精浸泡个半分钟一点事情都没有。我原代培养时候经常泡酒精消毒老鼠7 a( v7 @( ]: E) \1 Z
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植物组织培养还用氯化汞消毒呢，你怎么不批评一下？
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holywater

为什么我到哪儿都遇到这种人，题目都不看好就乱反对别人的？还你有没有做过手术，我没做过手术但是我做过200次的神经元原代培养！3 z3 M; E9 `* k

' D, l8 H9 ~" g/ W8 [- ~4 l论手术，我可能只会用菜刀切猪肉，但是论原代培养，那你就像婴儿画画。

evial

脑组织是无菌的，只要注意无菌操作应该是不会污染的，而胃黏膜是有菌的。小鼠可以酒精浸泡一下再取骨髓。你试过在培养基里面加点酒精或者其他消毒液看看细胞会不会死？+ ^7 h: R: r$ Z$ Z2 O
这和审题有关么？你写的内容已经给大家看到了么，你写了标题没有啊，大家都没看到你有标题么！/ J1 d- `3 f& p! ]4 D0 y3 m
那本老外写的protocal我们一起看看吧，那里写着用来培养的组织块可以用酒精或其他消毒液泡？: k3 t; F: u! z  ~# ]: M& |4 S, d
我是外科的，酒精在消毒剂中不是最强的。培养房的表面消毒我们用次氯酸钠消毒片做的水擦洗，连肝炎病毒都可以杀死，你要不试试用来泡组织？
" L$ W0 ?) v- a4 ^" J2 O+ _干细胞之家是交流学术的场地，不是小朋友吵架的。做科研和做人都要踏踏实实！