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asiar

新手上路

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新闻小组成员帅哥研究员

楼主

发表于 2012-3-6 20:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

免疫组化中一抗孵育时间及条件怎么确定？37。C 1h和4。C过夜或者室温孵育各有什么区别？抗体特异性哪个好？

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xiaoqi

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沙发

发表于 2012-3-6 20:44 |只看该作者

一抗孵育条件包括孵育时间、温度和抗体浓度，三者之间是相对的关系。浓度是最重要的先决条件，温度决定反应的速度而时间决定反应的量。一抗孵育温度有：4℃、室温、37℃，其中4℃效果最佳。至于孵育时间，这与温度、抗体浓度有关，一般37℃1-2h，而4℃则要过夜。其中，4℃最佳，反应最温和，背景较浅。37℃反应速度较快，时间较短。室温个人感觉不如前两者，条件不好控制。最常见的就是4度过夜这种。