iPS分化了吗？

也行天下

回复 frankieisme 的帖子
& }0 t' U0 e" E9 k9 B5 f
3 D& B; K! _9 ~  ]% w我觉得红圈圈起来的是传代时克隆太大了出现的结块现象吧，周边的倒像是分化了的。不知道对不对。我在进行iPS细胞传代时如果克隆太大就会出现克隆中间呈棕色现象。

katysong

回复 573639471 的帖子3 _4 v2 j' r7 z, f+ |+ M! E# ]
. p3 n. X+ Q; _3 [( u4 p
培养干细胞很多时候都要用机械法传代的，挑取好的克隆或是把已分化的克隆刮掉，有几种比较典型的分化情况分享一下：
$ l( L* O) o- n! U1. 克隆团中间塌陷，形成“孔状”，中间即为分化的细胞；( n' L" R6 D. u3 T) G% S) Z
2. 网状结构，不够致密，可能来源于已分化的干细胞或是上次传代残留的Feeder；
& i  k9 Z1 d; H$ f8 t$ L8 C& T3. 有中间隆起的发黑的细胞团应该是已经分化并死亡的细胞（个人感觉楼主的细胞有这种情况，应该之前就应该传代的，时间稍微晚了一点）；" C" m7 L! V# F+ C4 x2 ^0 l* Z
4. 还有一些克隆状态不好的，边缘会比较“混乱”，中间细胞形态也不均一，也应该舍弃；
# n9 D5 Y/ N* u  r% y* O6 U* I, c或许有不对的地方，希望对您的实验有所帮助……

sunny2829

回复 573639471 的帖子. L% P: g  d& B) V/ ^% \, n* Q, i0 V

; `! @0 n. G/ V% `& w7 u9 V个人认为那是未完全重编程的克隆，多层细胞，边缘细胞为不规则多边形，形态上与典型的ES克隆差别挺大的。

wangyimei

回复 573639471 的帖子# \* L8 \. }' |+ j6 T, h

. ^& _1 B5 p- A' d$ y8 h! T啊，这样啊，状态看着不是很好啊，看看从哪买来的，找他们的人问问看

dianying

回复 573639471 的帖子
- J/ M, _: p3 c! W% @' l& o/ Q7 i. i) W2 c
你确定是黑孔吗？如果是上面的一层膜，你可以试着拿针剥离开，看看底下的要是没分化，就还可以把它传代。

murry

周围已经分化了。污染了的细胞应该立刻马上处理掉！再放在培养箱内，或者打开盖子的话，很可能会把细胞房的环境污染掉！那就杯具了！

Jonathan

回复 song58 的帖子! d. q( ?, b9 A$ U, u

- a  [8 _) |: e0 t$ S你不要在这里误导他了。你画圈的这些克隆，没有一个好的。应该说，LZ的图片里面，没有好的克隆。基本都分化了。如果是我，就扔了。重新做。

lchanlon

你是不是加了ROCK inhibitor啊，如果没加的话应该是分化了。

573639471

回复 lchanlon 的帖子% N! a) r6 U' d$ z

- q1 |) B( l5 [: \8 k加了

荣荣荣

我以前机械法将细胞挑出来的时候，就是这个样子，过一段时间就展开了，即使不展开又用胰酶消化继续传代就好了。