PEI转染293T细胞血清影响大吗？ - 病毒转染干细胞专区干细胞之家



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wangsandan0503

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楼主

发表于 2012-3-16 09:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

使用PEI转染方法转染293T细胞，培养基使用含有血清的培养基影响大吗，主要原理是什么？

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沙发

发表于 2012-3-16 14:40 |只看该作者

有些影响，不是很大，主要原理是血清饥饿。

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wangsandan0503

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藤椅

发表于 2012-3-16 20:34 |只看该作者

回复 supergama 的帖子

反反复复始终包不出来病毒郁闷的要命

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wangsandan0503

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板凳

发表于 2012-3-16 20:35 |只看该作者

回复 supergama 的帖子, p* C" `7 [0 c. f; a: @- K- ]& W

你那里用什么病毒？

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modou1001

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报纸

发表于 2012-3-19 16:55 |只看该作者

最好不要用血清使细胞处于血清饥饿状态

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wangsandan0503

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地板

发表于 2012-3-26 10:34 |只看该作者

回复 modou1001 的帖子

你每次采用什么方法转染？步骤可以分享一下嘛？

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modou1001

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7楼

发表于 2012-3-26 13:32 |只看该作者

回复 wangsandan0503 的帖子: H: u" F1 N8 j; o7 i# r/ h4 _
/ L; j" G; R- g4 ~
电转，PEI和LTX 都用的现在基本用后面两种， PEI 的是：溶液1是培养基和质粒的混合，溶液2是培养基和PEI的混合，然后将溶液2缓慢加入到溶液1中注意一定要缓慢，室温静置15-45分钟我们一般是静置30分钟。在这个过程中可以做细胞的准备工作，清洗细胞后加“三无”培养基，静置一会儿，再把上述混合的溶液加进去就可以了。具体PEI和质粒的比例你要自己做梯度摸最适合的比例的。