人脐带间充质干细胞过早老化的问题

yangwy028

回复 cactus006 的帖子
- n! n! l4 m  g/ g' k3 n
: j" Y7 A7 X* ?& l黑胶虫污染的时候镜下就可以看到那些不规则蠕动的生物，这个你完全可以自己鉴别的

喇叭shopping

细胞培养太密会造成过早老化，应在培养50%-60%贴壁时进行传代。

he_liang

回复 cactus006 的帖子
$ Y( P3 _7 {" S" w/ Q/ u1 j
& ]3 _6 \- E. ?/ e  ~! N% c0 n很抱歉哦，我养的不是hUCMSCs，不过我看过一些文献，要加一些bFGF什么的，好几种因子

cactus006

回复 he_liang 的帖子4 l( z  d2 o3 Q6 }4 a9 H
: b: r) F  [6 n1 i
你好，你们实验室的只用基础培养基+FBS么，细胞状态怎么样呢？

he_liang

回复 cactus006 的帖子
7 ]) r( `0 N& h0 ~( \* b& @7 ^' {9 S2 Y5 n
状态挺好的，我养的是普通的成纤维细胞

cactus006

回复 he_liang 的帖子; R) G5 f. a/ s% R: U+ |% m
5 F9 Q* w* ~4 W  R
哦，这样啊，细胞不一样需求的营养也不一样

相文

我的做出来的原代就很粗糙，没有立体感，细胞核很大，用0.025%的胰酶消化10分钟都下不来，我用的是L-DMEM+GIBCO血清20%，里面加了vc，我的组织块剪的很小的试过，剪大的也试过。每次都剪了先不加培养基半小时让他贴稳，然后再加培养基。五天第一次换夜观察，但每次做出来细胞很少，细胞核很大而且消化不下了。我用的是大皿。我现在考虑1：胰酶浓度不够？2；换液时间长？
$ }4 g/ h, }, B. p9 v+ U1 F3，血清不好？4：培养基里还需加点什么？5，不该用大皿？真头疼，各位做出来了的麻烦指教指教，谢谢！, Y5 z: C+ t1 B( q, e

he_liang

回复 cactus006 的帖子
/ A. J  f- U8 A& d. @
0 g% L8 p  M3 P$ \* j/ \* z) E我问了一下别的朋友，他们用的是低糖的DMEM，你可以试试