人脐带间充质干细胞过早老化的问题

cactus006

大家好，我养的hUCMSCs，组织贴壁法培养的，细胞长到P2代就开始变得扁平，粗糙，没有立体感，感觉像是老化了，一直找不到原因，我现在的培养条件是L-DMEM+hyclone北美来源的FBS，不知道是不是FBS的问题，请大家帮忙分析一下原因，并帮我推荐一款FBS的货号，谢谢了！ 6 I* c/ K+ c+ V( {& C" h( r

% m# Q+ L4 q1 G: D7 Y

nydfy

北美的血清都是走私来的，虽然便宜但质量可能会出问题，你可以试试GIBCO血清（货号：10099141或12664025）。你可参考这篇文献的做法（Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)），有视频参考！

cactus006

回复 nydfy 的帖子
* Z( R( u5 c* c
* B4 [! ~+ I+ F) u" u非常感谢您，我自己总结了下，感觉应该是跟血清有关系，但是觉得不知道那个血清好用，摸索这个可能得要一段时间啊，而且有些血清，即使同一批货号不同批号之间也会有差别的！

yangwy028

是不是消化过度了？7 |/ v. r2 G0 h5 K
既然是进口的血清，经过正常的检查了的，结果就不会相差这么多，而导致如此严重的问题。应该首先从自己的基本操作开始考虑其中存在的问题的。

he_liang

北美的血清确实很不好用，我们实验室都是用南美的血清

he_liang

补充一下，货号SV30087.02

xiaf_0

回复 nydfy 的帖子
$ E8 \! [. W* t
( K. K* g- Z7 h您好，请问您能提供一下视频和protocol吗，那个需要注册，一般人看不了

pailishi

看看消化过程是否正常？

cactus006

回复 yangwy028 的帖子, s5 a- V# N1 i2 ^

" I/ Z4 s8 B& O5 w% m9 \4 Q: y9 c, M非常感谢您的分析！应该不是消化过度或者操作的问题，因为使用过一批血清，细胞的生长状况还可以，传7--8代形态都没什么变化的，但是那个FBS可能是有传说中的黑胶虫之类的污染，所以现在想换另外一个血清用用，但是还没找到适合的，细胞老出现过度老化的问题。真是头痛啊！

cactus006

回复 he_liang 的帖子
' l  {# O3 G. X, N4 m! Z2 u! g0 J9 [/ n4 y( ^
您好，非常感谢您的经验分享！请问您养的也是hUCMSCs么，您用南美血清的时候还添加了其他生长因子么？
! W6 y& X  c, z* D, f* f1 ?5 L