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[请教] 请教基因过表达质粒? [复制链接]

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楼主
发表于 2012-3-19 09:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本人想做过表达一基因,但是只有EGFP-C1,但是不想做融合蛋白,但又想要GFP的质粒。( }1 h/ x6 R4 r8 f+ l+ C; F. d
有什么质粒能够单独表达框表达基因,且同时能够表达GFP的?
4 \0 K" g. G4 }# \1 U
! x3 b+ I) j2 N, \( M1 Z2 b谢谢!
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2012-3-19 13:27 |只看该作者
sorry 不是很理解你的问题。我理解你的问题是,怎样让想表达的蛋白(蛋白X)和GFP都能够表达(在同一个质粒上),但是不是融合蛋白?
* R9 f8 L( V, ^2 v8 M; @% {; P$ p如果是这个意思,我有两个办法。1,将GFP和蛋白X用两个启动子,比如,一个用CMV,一个用EF1a,分别在后面接上开放阅读框和加A信号。
  a* V( b6 n. b& @2,在同一个阅读框中表达两种不同蛋白。你可以查一下关于IRES序列的知识。IRES序列可以让一条mRNA同时表达两个完全不同的蛋白。只不过IRES后面的蛋白表达量略低。
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藤椅
发表于 2012-3-23 09:21 |只看该作者
帮你推荐几种:
7 e3 W% b# \) N: }. ~5 |* M! R1.pMYs-IRES-GFP Retroviral Vector (Cell Biolabs公司,逆转录病毒骨架)
" c5 I2 _# m4 B2. pTracer™-CMV2 (Invitrogen公司)8 D7 _/ }7 F: c  p
3.pLVX-IRES-ZsGreen1(Clontech公司,慢病毒骨架)
/ p! ^# l" ^2 z& z4 f% j- i! [可以根据自己的试验要求选择
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板凳
发表于 2012-3-27 10:42 |只看该作者
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好的,谢谢各位了!问题我得到你答案后,解决了!
8 J; D  g& }$ x: `, f# ~
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