请教一个问题 为什么基因打靶要用雄性ES细胞系

cicadacjk

这个太容易解释了，你自己想象一下操作过程就知道/ R" b1 a8 m; P5 n8 A, T: ^2 ^3 k
敲除的限制步骤是germline transmission
* r* v  J) |4 t* Y. E说到底，这就是茶壶和茶杯的关系

wlj0912

回复 懵懂干细胞 的帖子1 O3 ~  ^* N, c" h' x# L

$ H* l4 [0 ^" B* B$ k0 m. Z" F/ _雄性的小鼠一旦出现嵌合鼠了，可以和很多母鼠交配，F1代比较容易出现

qizhi502

因为那个时代转基因动物的出生所使用的是嵌合的办法，嵌合动物的出生雄性概率和存活率都很高，但是克隆和四倍体嵌合技术较为完善的话，也可用xx的细胞系

colindream

刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。
3 G1 r9 ?2 K+ r5 R9 S: d2 a我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。9 F2 a/ @+ @% @7 I# p& `

& `9 X( |( o; R+ X/ h+ ^germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。
. W/ }8 Y1 W: Q7 G: u  r% ~5 T4 G2 R望大侠 指教！！！

colindream

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' z8 @  l1 w" W, i9 V: V) c5 K3 A刚开始接触 干细胞，对 germline transmission 实在是不太理解。 6 Z/ l- u1 C; X, i! V+ G  g- G3 K
我现在刚开始做 gene targetting,,现在筛选 ES 阳性克隆。
0 c  @  M  \2 p
" t& j  P" b- i' [0 y8 {germline transmission 的理解，实在是没有概念，。，。9 i: l6 _" c, D0 \# s3 i
望大侠 指教！！！

细胞海洋

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" T; s" x# U  n1 _) ?9 `) G+ \9 }) O
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usepray

长期以来做基因打靶一直接在小鼠等动物水平,而打靶效率很不一致,很少情况下能得到一个等位基因打靶的细胞系,所以通常的做法是将一个等位基因打靶的细胞系(ES)培育成小鼠,然后将其与正常(通常带有重组酶)异性交配,有1/4概率得到两个等位基因打靶的纯合子后代; 如果起始用的一个等位基因打靶的细胞系(ES)是母的,一次交配只能产生一窝;如果是公的,你想想可以多少窝,这样可以保证拿到或拿到更多纯合子,这就是germline transmission.
4 S9 H# [$ o& t! s9 S( |: ?但是随着打靶技术的发展,在人等高等动物细胞水平也可以实现打靶后, 伦理上你不能培养克隆人,不存在利用germline transmission产生纯合子的可能性;所以用XY的XX的(如果不存在什么易于同源重组的说法,这个还真不了解)都一样了,可以看到文献中有用H1也有用H9或其它人的ES细胞系.

concentrate123

应用雄性的比较好吧，建系成功如果想对y染色体进行基因修饰，用雌性岂不是不能处理？

qq007www

还是看你打靶的基因在哪吧，但好像说雄性细胞基因稳定遗传性较好
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