请教酶消化法培养脐带间充质干细胞的问题

jxaf3900824

消化过后一定要大量稀释、清洗，酶对细胞损伤很大

xuyang0317

消化后可以加血清终止反应的，不需要稀释！

wangling0607

回复 细胞干 的帖子4 I! T8 r9 T4 J; @* v
9 ?3 r9 O6 L; |. b) Z
我一般的做法是不是全把上清去掉，慢慢吸，剩下最底下的1-2ml，这样保证细胞不会被倒掉。
3 P1 S* t6 M5 @9 G8 v6 f我之前做过拿胰酶消化的，感觉效果不明显，还增加了步骤和污染的机会，所以没用胰酶了，感觉也挺好的，应该是先过滤再离心，这样大的组织块就可以先去掉了

mengnancy

开始培养脐带间充质MSC时，我用0.1%的I型胶原酶消化，消化过后没有用PBS大量稀释、清洗，细胞受损伤，虽然有大量的细胞，但是由于有胶原酶附着，细胞也被消化了。组织块培养7-10天，就有MSC从组织块爬出，更容易得到MSC，为什么要用酶消化法？

2013sp

回复 pailishi 的帖子
# ^. w" K  m( w% J" o' w: b$ T
跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

2013sp

回复 pailishi 的帖子4 B2 N9 @& A# O

+ x) @( ]8 n2 C! s6 W跪求酶消化法培养脐带间充质干细胞的操作步骤。

2013sp

回复 pailishi 的帖子: s) `! ^# c  t1 v

& A& R4 l# A' {+ t) G0 [5 p/ d用哪三种酶消化，三种酶的浓度与加的量各是多少？？？？？？求教，谢啦！！！！

pailishi

回复 2013sp 的帖子
4 c+ r; u8 S! e
1 K" c+ D. ]5 _/ W+ C自己去查别人的硕士毕业论文吧，详细得很

2013sp

回复 pailishi 的帖子8 v$ Q' Z, @$ R9 V

6 f$ ^+ l0 u, _+ {6 k7 _请问使用哪三种酶以及浓度、用量。; b1 _' @  R3 f0 E. Y6 x; o% j

tess1029

用一型和透明质酸酶混合试试