帮忙看看像不像肿瘤干细胞球

jojomayer

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: k3 `+ H2 w  Q回复 ccnuld 的帖子
8 u. I8 ?6 O  ]/ R8 V6 G
: y3 {  t/ a- c  U对，这个我在文献上看到了，有的人不加血清(serum)而加从血清中提取的血清白蛋白(serum albumin)，貌似也可以，但是我还不太确定，这样的文献比纯无血清的少

小木梅

回复 jkfly 的帖子; O+ C3 ?1 J/ c6 ?" b

# e  C+ G$ K! \7 \9 y6 }5 |/ R多谢！

lxm5668

MCF-7细胞是我课题的主要细胞，我的观点是您的细胞状态不好，没有贴壁，这种细胞不能作为正常的细胞去培养和使用，更谈不上干细胞球。肿瘤细胞球和干细胞球是两回事。

amosummer

请问这个是原代的，还是细胞系？感觉很像哦！

小木梅

回复 amosummer 的帖子6 M' Q5 @3 E# G# V

1 y' @% R7 u/ o! k. t7 ]. ^) o5 D细胞系mcf-7

小木梅

回复 lxm5668 的帖子8 s9 P0 R( [9 v; _6 \

; L3 x$ H9 N! `* ^啊。。。我后来拿来贴壁了，贴壁长的很好啊，几乎没有漂浮的死细胞……

leisong12

是tumorsphere没错了，用无血清培养基添加某些生长因子，最好用低黏附板子培养，消化有的用胰酶，有的用更柔和的酶如accutase等。这是一种粗略的富集肿瘤干细胞的方法，瘤球应该能连续传代培养的，形成的次级瘤球会更进一步富集肿瘤干细胞，鉴定时可直接用免疫荧光标记后共聚焦显微镜观察，或消化瘤球后标记荧光流式检测，具体标哪个分子就看细胞类型了，查文献找该种瘤特异标志物或干细胞通用标志物如OCT3/4, catenin, nanog等等, 瘤球细胞如果接种免疫缺陷鼠其成瘤能力应该比常规贴壁培养细胞强的多。

小木梅

回复 leisong12 的帖子
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$ J  W+ s* B4 o- w2 p直接用免疫荧光可以？我看文献几乎都是用的流式，流式对数量要求高点，如果免疫荧光可以的话，就比较好办些。随便请教一下，OCT3和OCT4是两种吧？有些文献里做oct4，有些染OCT3/4,这是怎么的？

leisong12

回复 小木梅 的帖子5 H7 `) m5 y9 \
) L- k9 q9 i; k/ O  N! x
oct3/4做PCR用的比较多，应该是同源性较强，相同引物出来的代表了3/4, 免疫反应可能抗体有所不同，所以有的是4有的又同时标3/4，其实问题不大，都可以用的。

renkq

这个是肿瘤干细胞形成的肿瘤球，因为只有肿瘤干细胞才能在干细胞条件培养基中成活