有谁铺过poly-hema的板子？

lamoon

在板上潜水很久，学了不少东西。最近打算做悬浮球培养，文献中提到用poly-hema包被的细胞培养板来培养悬浮球细胞，请问各位大牛这种东西有现成的东西可买么？是否为悬浮球培养所必须？万望赐教

yuanyan2010

10% poly HEMA：称取6g多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯（2-hydroxyethylmethacrylate，poly HEMA），加到50ml 95%乙醇中，于37℃恒温振荡水浴箱中缓慢振荡过夜，次日将所得溶液离心（2500r/min，10min），除去未溶解的颗粒，此为干液。取1ml干液与9ml 95%乙醇混合，稀释成10%（V/V）的poly HEMA溶液；取0.9ml 10% poly HEMA溶液铺在直径为60mm的塑料培养皿内，水平放置在通风的超净工作台上干燥（过夜）；使用前将包被poly HEMA的培养皿用灭菌紫外灯照射30min；0 w' l: [, |# M; d7 e. d5 n, g

, I! R) l' D/ [取poly-HEMA用950 mL/L的乙醇, 配置成浓度为120 g/L的储存液, 混合过夜. 800 g离心, 去除未溶物, 1∶10用950 mL/L乙醇稀释, 制成工作液. 加入平皿, 室温干燥过夜, 用之前, 用PBS漂洗2次.
) H% |& Y6 a, [# q/ H5 E0 g( L" o6 x: W& n
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lamoon

多谢指点！！

redleafwang

好复杂啊

redleafwang

好复杂啊

一滴清露lv

请问您的HEMA包被培养皿养的细胞怎么样啊？我想请教一下，我把HEMA溶解后，加入培养皿中后，它总是立即就凝固，在皿里一块一块的，很不均匀，养出的细胞也不理想，没有或少有细胞球形成，与皿没包好有关吗？

细胞海洋

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一滴清露lv

发了，可是没人回。。。