间充质干细胞培养

xu_shufen

各位同仁好！我现在培养骨髓间充质干细胞，使用的是DMEM/F12+20%FBS培养基，当培养到第三代时，细胞停止生长，也看不出有分化现象，能帮助分析一下原因吗？谢谢！

nicolelea

有的细胞就是会不长，或者支原体污染，做个支原体污染检测吧。
& i0 C, @/ @1 b* u0 {) [) R我有一株不长是因为污染；另外一株到P6不长，据说是本身就这样。。。

liluli0715

原因有很多，可能是你消化过程太长损伤了细胞，也可能使你的FBS浓度有点高，细胞出现衰老，也可能是出现了污染

zhj1988

回复 liluli0715 的帖子, O, P- K" d, l3 x, C0 J# P
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我觉得是培养基的原因，我用的是DMEM低糖，10%FBS，现在养到12代了，状态还可以。

tingwuyu

一般都是用10%的FBS，你这个20%会不会有点高了

快乐成长

细胞状态怎么样，每批次都是长到三代？可以降低一下血清浓度。

tanrufu

20%的FBS是不是太高了？我们一直都是加5%的FBS，哪怕是由于细胞来源的原因生长状态不好也不会出现6代以前不生长的情况，只是出现不同的分化差异.建议做个对比参照实验吧用不同的FBS比例培养同一批细胞……

yongchen1314

DMEM/F12我也用这个养过MSC，不比LG-DMEM差，我血清为10%，你这个估计是其他原因，第三代细胞应该不会出现这种情况。