请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

avbn

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( W# p+ m! T% L- t* M# t7 [多谢指导，我做的是小鼠，每次是只取一只小鼠的脂肪吗？以前也做过人的，感觉小鼠的细胞特别小。

your1024

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6 ^& d- q( Z  v* G7 l4 N# v$ b当然不是了，我是说取一只的情况下。如果要大量培养，取7、8只也没问题啊。是，老鼠的脂肪不多，所以几乎每次都还要取点背部的作补充。

dj_hust1987

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8 K. a3 u/ J* q取附睾脂肪垫比腹股沟脂肪好一些吗？附睾脂肪是不是位于腹腔里面啊？

sunflower636

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3到4天都不换培养基吗？细胞会不会营养不够啊？

your1024

回复 sunflower636 的帖子: ?  j; M8 k* J9 b: P' D
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刚开始的时候稍微加多一点培养基，是没有问题的，至少我们这么做是没有问题的。3~4天的时候你可以小心的观察一下，如果培养基变黄了，可以换液。如果这时候看到细胞还是没有爬出来，其实也可以让它继续等等。这个做多几次就大概能摸出来了，我们当时刚开始做的时候都有放6、7天不管的，我们做的小鼠，ADSC很皮实的。

your1024

回复 sunflower636 的帖子8 D" q/ d/ k$ ^) z" w

5 f3 e2 R0 {. k/ {7 M其实关于取多少细胞、加多少液体、什么时候换液、什么时候传代、怎么传代这些问题，很多实验室都有自己的一套方法，你在听取大家的意见之后，还是自己摸索一个适合自己和实验室的路子比较好。

sunflower636

回复 your1024 的帖子2 n& d/ [3 h$ s( }
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嗯，看来还得继续摸索了。我做的是人的，2到3天我根本没有看到细胞贴壁，一点都没有，下次我试着初次多加培养基，这样看看时间久点它会不会贴壁。漫漫之路啊！！

your1024

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人的细胞应该是比较慢一些，实验室有人做过，我没做过不好说。不过我觉得2~3天没细胞可能还正常，一点不贴壁恐怕是有些问题的吧。

sunflower636

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哎，最近各种抓狂啊。多谢各位前辈的指导，我要继续摸索，希望有了好消息与大家分享的那天！

wiling123

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回复 your1024 的帖子1 i& X9 }! v# N. ~, S6 E7 L

' `' `( ?# D" n; X. c' ?你好，我最近也在养小鼠ADSCs，一直养不好。你的小鼠脂肪干细胞培养步骤能详细说一下吗？。谢谢啦。