请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

avbn

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回复 your1024 的帖子- q$ E! l- X2 ^1 F9 h% f5 L

  T8 g* e! C& t( V. w" r多谢指导，我做的是小鼠，每次是只取一只小鼠的脂肪吗？以前也做过人的，感觉小鼠的细胞特别小。

your1024

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# a9 R5 p0 L7 r3 G' m1 i; a% D8 N% ?( x( ^/ R+ R0 L- c. U5 e" z
当然不是了，我是说取一只的情况下。如果要大量培养，取7、8只也没问题啊。是，老鼠的脂肪不多，所以几乎每次都还要取点背部的作补充。

dj_hust1987

回复 regene 的帖子  b; A3 y9 z5 R+ E4 l6 f+ ~( g
( l( W- |: D1 u* S) @) b
取附睾脂肪垫比腹股沟脂肪好一些吗？附睾脂肪是不是位于腹腔里面啊？

sunflower636

回复 your1024 的帖子4 [2 L$ u& j1 u1 H  b' C
4 Y2 p/ p9 |5 V. b8 k- b
3到4天都不换培养基吗？细胞会不会营养不够啊？

your1024

回复 sunflower636 的帖子
( q) q4 v( m( k1 c2 d7 B3 n) ?2 u7 O& I  d6 d  n" {
刚开始的时候稍微加多一点培养基，是没有问题的，至少我们这么做是没有问题的。3~4天的时候你可以小心的观察一下，如果培养基变黄了，可以换液。如果这时候看到细胞还是没有爬出来，其实也可以让它继续等等。这个做多几次就大概能摸出来了，我们当时刚开始做的时候都有放6、7天不管的，我们做的小鼠，ADSC很皮实的。

your1024

回复 sunflower636 的帖子  v4 E( n9 N7 ~6 |$ g" D# O

1 X1 S$ @. {4 o7 F% U6 k1 P* s* Q8 `3 e" _其实关于取多少细胞、加多少液体、什么时候换液、什么时候传代、怎么传代这些问题，很多实验室都有自己的一套方法，你在听取大家的意见之后，还是自己摸索一个适合自己和实验室的路子比较好。

sunflower636

回复 your1024 的帖子$ r) w# w+ Q% |+ w* |! N7 y
" C1 s& x" f3 Z1 Y$ m/ e
嗯，看来还得继续摸索了。我做的是人的，2到3天我根本没有看到细胞贴壁，一点都没有，下次我试着初次多加培养基，这样看看时间久点它会不会贴壁。漫漫之路啊！！

your1024

回复 sunflower636 的帖子# R2 H" ?! H* f
: [9 w1 i9 k) q, U  K/ D
人的细胞应该是比较慢一些，实验室有人做过，我没做过不好说。不过我觉得2~3天没细胞可能还正常，一点不贴壁恐怕是有些问题的吧。

sunflower636

回复 your1024 的帖子
3 X0 k( f& D. \  `. {
9 l1 P# a4 e8 {哎，最近各种抓狂啊。多谢各位前辈的指导，我要继续摸索，希望有了好消息与大家分享的那天！

wiling123

: |& F+ X2 A( g) p
( x1 ?4 e: ?2 b+ R6 y- z3 L回复 your1024 的帖子! A$ V$ Z, w' q6 d+ U9 o

  H8 v( Z: R1 R, {- U( A你好，我最近也在养小鼠ADSCs，一直养不好。你的小鼠脂肪干细胞培养步骤能详细说一下吗？。谢谢啦。