细胞转染时80%的细胞密度如何界定

rexhz

慢病毒生产时，需要在细胞密度80%做转染，在网上找来找去都没找到293T 80% 密度的图片，论坛里面是否有战友贴个80%图来看看，另外只有在一篇文章中这样描述80%密度的5 B9 b# y2 Z9 s6 o5 n

( Z' e2 F  R2 l$ @ Observe the dishes seeded on Day 1. When cells are 80–90% confluent they are ready for transfection.* ^, N, F% q* h1 M  k
▲ CRITICAL STEP The cells should still have room to undergo 1–2 cell divisions: e% y! B- K5 T
这里提到有空间容纳1-2细胞分裂，望战友贴图指教

lxm5668

照片没存过。只凭眼力了。描述一下，仅供参考：& [. M" Y; P0 [4 |# E5 d: w5 t! e
首先，细胞必须传的均匀，不能一块一块的，转染效率不好，也不好估计密度。
( Z- x7 g- k; f6 c6 P8 B其次，细胞触角能伸展开，并且触角之间能够连接上，但中间有空隙，就这时转染效率很高。- B$ o5 W8 N3 W7 e2 X% _
想象把细胞推到一起后，空余的地方还有五分之一大，就是80%呗！

hndxws

这只是个大约的数量，你这样严格的做，太机械化了

huangcong1988

呵呵，谢谢你帮我解答关于病毒与细胞比例的问题，我也过来帮你答疑，算是投桃报李吧。
  C- l- l+ e7 r$ w+ |" \" Y- `不知道你在包毒的时候用什么养293T，我是用10cm dish，一般是我一瓶（T25）293T细胞长满后，接到10cm dish中，然后让其长一天，那个时候基本就能转染了，这是经验，不过293T状态不一样的话，可能会有微小差别，一般293T长得还是很快的，一天基本能传一代（1传3，一天基本就能长到80,90%），而且在转染过程中，293T还会长的，到最后，整个皿全铺满了细胞，所以在转染的时候细胞多一点少一点影响还是不是很大（70,80,90)都行，不过不要太多，太多最后细胞都叠起来了。7 |! [: {  j: p/ M' n- M2 s) x
这个凭肉眼还是不好看，凭经验吧，包毒效果好的比例就行，因为细胞状态可能不一样

yyshpy

对，这个凭着经验，跟周围的人学习几次，就可以把握了，80%就是细胞占到了80%，中间留着空隙，上面的盆友们介绍的还是挺详细的